nature.com സന്ദർശിച്ചതിന് നന്ദി. നിങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന ബ്രൗസർ പതിപ്പിന് പരിമിതമായ CSS പിന്തുണ മാത്രമേ ഉള്ളൂ. മികച്ച അനുഭവത്തിനായി, ഏറ്റവും പുതിയ ബ്രൗസർ പതിപ്പ് ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ ഇന്റർനെറ്റ് എക്സ്പ്ലോററിൽ അനുയോജ്യതാ മോഡ് ഓഫാക്കുക). കൂടാതെ, തുടർച്ചയായ പിന്തുണ ഉറപ്പാക്കാൻ, ഈ സൈറ്റിൽ സ്റ്റൈലുകളോ ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റോ ഉൾപ്പെടുത്തില്ല.
മെലാമൈൻ ഒരു അംഗീകൃത ഭക്ഷ്യ മലിനീകരണ വസ്തു ആണ്, ഇത് ചില ഭക്ഷണ വിഭാഗങ്ങളിൽ ആകസ്മികമായും മനഃപൂർവ്വമായും അടങ്ങിയിരിക്കാം. ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തലും അളവെടുപ്പും സ്ഥിരീകരിക്കുക എന്നതായിരുന്നു ഈ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം. ഇറാനിലെ വിവിധ പ്രദേശങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള ശിശു ഫോർമുലയും പാൽപ്പൊടിയും ഉൾപ്പെടെ ആകെ 40 വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ ഭക്ഷണ സാമ്പിളുകൾ വിശകലനം ചെയ്തു. ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി-അൾട്രാവയലറ്റ് (HPLC-UV) സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിളുകളിലെ ഏകദേശ മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കം നിർണ്ണയിച്ചു. 0.1–1.2 μg mL−1 പരിധിയിലുള്ള മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തലിനായി ഒരു കാലിബ്രേഷൻ കർവ് (R2 = 0.9925) നിർമ്മിച്ചു. അളവെടുപ്പിന്റെയും കണ്ടെത്തലിന്റെയും പരിധികൾ യഥാക്രമം 1 μg mL−1 ഉം 3 μg mL−1 ഉം ആയിരുന്നു. ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ പരീക്ഷിച്ചു, ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടി സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ അളവ് യഥാക്രമം 0.001–0.095 mg kg−1 ഉം 0.001–0.004 mg kg−1 ഉം ആണെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. ഈ മൂല്യങ്ങൾ EU നിയമനിർമ്മാണത്തിനും കോഡെക്സ് അലിമെന്റേറിയസിനും അനുസൃതമാണ്. കുറഞ്ഞ മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കമുള്ള ഈ പാൽ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ഉപഭോഗം ഉപഭോക്തൃ ആരോഗ്യത്തിന് കാര്യമായ അപകടസാധ്യത സൃഷ്ടിക്കുന്നില്ലെന്ന് ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്. അപകടസാധ്യത വിലയിരുത്തലിന്റെ ഫലങ്ങളും ഇതിനെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു.
മെലാമൈൻ C3H6N6 എന്ന തന്മാത്രാ സൂത്രവാക്യമുള്ള ഒരു ജൈവ സംയുക്തമാണ്, ഇത് സയനാമൈഡിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞതാണ്. ഇതിന് വെള്ളത്തിൽ വളരെ കുറഞ്ഞ ലയിക്കുന്ന സ്വഭാവമുണ്ട്, ഏകദേശം 66% നൈട്രജനും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. പ്ലാസ്റ്റിക്, വളങ്ങൾ, ഭക്ഷ്യ സംസ്കരണ ഉപകരണങ്ങൾ (ഭക്ഷണ പാക്കേജിംഗ്, അടുക്കള ഉപകരണങ്ങൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെ) എന്നിവയുടെ നിർമ്മാണത്തിൽ നിയമാനുസൃതമായ വിശാലമായ ഉപയോഗങ്ങളുള്ള വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന വ്യാവസായിക സംയുക്തമാണ് മെലാമൈൻ. രോഗങ്ങളുടെ ചികിത്സയ്ക്കുള്ള ഒരു മരുന്നായി മെലാമൈൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു. മെലാമൈനിലെ നൈട്രജന്റെ ഉയർന്ന അനുപാതം സംയുക്തത്തിന്റെ ദുരുപയോഗത്തിനും പ്രോട്ടീൻ തന്മാത്രകളുടെ ഗുണങ്ങൾ ഭക്ഷണ ചേരുവകൾക്ക് നൽകുന്നതിനും കാരണമാകും3,4. അതിനാൽ, പാലുൽപ്പന്നങ്ങൾ ഉൾപ്പെടെയുള്ള ഭക്ഷ്യ ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ മെലാമൈൻ ചേർക്കുന്നത് നൈട്രജന്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. അങ്ങനെ, പാലിലെ പ്രോട്ടീൻ അളവ് യഥാർത്ഥത്തിൽ ഉണ്ടായിരുന്നതിനേക്കാൾ കൂടുതലാണെന്ന് തെറ്റായി നിഗമനം ചെയ്തു.
ഓരോ ഗ്രാം മെലാമൈൻ ചേർക്കുമ്പോഴും ഭക്ഷണത്തിലെ പ്രോട്ടീൻ അളവ് 0.4% വർദ്ധിക്കും. എന്നിരുന്നാലും, മെലാമൈൻ വെള്ളത്തിൽ വളരെ ലയിക്കുന്നതിനാൽ കൂടുതൽ ഗുരുതരമായ ദോഷം വരുത്തും. പാൽ പോലുള്ള ദ്രാവക ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ 1.3 ഗ്രാം മെലാമൈൻ ചേർക്കുന്നത് പാലിലെ പ്രോട്ടീൻ അളവ് 30% വർദ്ധിപ്പിക്കും. 5,6. പ്രോട്ടീൻ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് മൃഗങ്ങളിലും മനുഷ്യ ഭക്ഷണങ്ങളിലും പോലും മെലാമൈൻ ചേർക്കുന്നുണ്ടെങ്കിലും7, കോഡെക്സ് അലിമെന്റേറിയസ് കമ്മീഷനും (സിഎസി) ദേശീയ അധികാരികളും മെലാമൈനെ ഒരു ഭക്ഷ്യ അഡിറ്റീവായി അംഗീകരിച്ചിട്ടില്ല, വിഴുങ്ങുകയോ ശ്വസിക്കുകയോ ചർമ്മത്തിലൂടെ ആഗിരണം ചെയ്യുകയോ ചെയ്താൽ അത് അപകടകരമാണെന്ന് പട്ടികപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്. 2012-ൽ, ലോകാരോഗ്യ സംഘടനയുടെ (ഡബ്ല്യുഎച്ച്ഒ) ഇന്റർനാഷണൽ ഏജൻസി ഫോർ റിസർച്ച് ഓൺ കാൻസർ മെലാമൈനെ ക്ലാസ് 2 ബി കാർസിനോജനായി പട്ടികപ്പെടുത്തി, കാരണം ഇത് മനുഷ്യന്റെ ആരോഗ്യത്തിന് ഹാനികരമാകാം8. മെലാമൈനുമായി ദീർഘകാലമായി സമ്പർക്കം പുലർത്തുന്നത് കാൻസറിനോ വൃക്ക തകരാറിനോ കാരണമാകാം2. ഭക്ഷണത്തിലെ മെലാമൈൻ സയനൂറിക് ആസിഡുമായി സംയോജിച്ച് വെള്ളത്തിൽ ലയിക്കാത്ത മഞ്ഞ പരലുകൾ ഉണ്ടാക്കുന്നു, ഇത് വൃക്ക, മൂത്രാശയ കലകൾക്കും മൂത്രാശയ കാൻസറിനും ശരീരഭാരം കുറയ്ക്കലിനും കാരണമാകും9,10. ഇത് കടുത്ത ഭക്ഷ്യവിഷബാധയ്ക്കും ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിൽ മരണത്തിനും കാരണമാകും, പ്രത്യേകിച്ച് ശിശുക്കളിലും കുട്ടികളിലും.11 ലോകാരോഗ്യ സംഘടന (WHO) CAC മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി മനുഷ്യർക്ക് മെലാമൈനിന്റെ അനുവദനീയമായ ദൈനംദിന ഉപഭോഗം (TDI) പ്രതിദിനം 0.2 mg/kg ശരീരഭാരമായി നിശ്ചയിച്ചിട്ടുണ്ട്.12 യുഎസ് ഫുഡ് ആൻഡ് ഡ്രഗ് അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ (യുഎസ് എഫ്ഡിഎ) മെലാമൈനിന്റെ പരമാവധി അവശിഷ്ട അളവ് ശിശു ഫോർമുലയിൽ 1 mg/kg ഉം മറ്റ് ഭക്ഷണങ്ങളിൽ 2.5 mg/kg ഉം ആയി നിശ്ചയിച്ചിട്ടുണ്ട്.2,7 2008 സെപ്റ്റംബറിൽ, നിരവധി ആഭ്യന്തര ശിശു ഫോർമുല നിർമ്മാതാക്കൾ അവരുടെ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ പ്രോട്ടീൻ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനായി പാൽപ്പൊടിയിൽ മെലാമൈൻ ചേർത്തതായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടു, ഇത് പാൽപ്പൊടി വിഷബാധയ്ക്ക് കാരണമാവുകയും രാജ്യവ്യാപകമായി 294,000-ത്തിലധികം കുട്ടികളെ രോഗികളാക്കുകയും 50,000-ത്തിലധികം പേരെ ആശുപത്രിയിൽ പ്രവേശിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. 13
നഗരജീവിതത്തിലെ ബുദ്ധിമുട്ടുകൾ, അമ്മയുടെയോ കുഞ്ഞിന്റെയോ അസുഖം തുടങ്ങിയ വിവിധ ഘടകങ്ങൾ കാരണം മുലയൂട്ടൽ എല്ലായ്പ്പോഴും സാധ്യമല്ല, ഇത് ശിശുക്കൾക്ക് ഭക്ഷണം നൽകാൻ ശിശു ഫോർമുല ഉപയോഗിക്കുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു. തൽഫലമായി, ഘടനയിൽ മുലപ്പാലിനോട് കഴിയുന്നത്ര അടുത്ത് നിൽക്കുന്ന ശിശു ഫോർമുല നിർമ്മിക്കുന്നതിനുള്ള ഫാക്ടറികൾ സ്ഥാപിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്14. വിപണിയിൽ വിൽക്കുന്ന ശിശു ഫോർമുല സാധാരണയായി പശുവിൻ പാലിൽ നിന്നാണ് നിർമ്മിക്കുന്നത്, കൂടാതെ സാധാരണയായി കൊഴുപ്പ്, പ്രോട്ടീൻ, കാർബോഹൈഡ്രേറ്റ്, വിറ്റാമിനുകൾ, ധാതുക്കൾ, മറ്റ് സംയുക്തങ്ങൾ എന്നിവയുടെ പ്രത്യേക മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ചാണ് ഇത് നിർമ്മിക്കുന്നത്. മുലപ്പാലിനോട് അടുക്കുന്നതിന്, ഫോർമുലയിലെ പ്രോട്ടീനും കൊഴുപ്പും വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ പാലിന്റെ തരം അനുസരിച്ച്, ഫോർമുല വിറ്റാമിനുകളും ഇരുമ്പ് പോലുള്ള ധാതുക്കളും പോലുള്ള സംയുക്തങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് ശക്തിപ്പെടുത്തുന്നു15. ശിശുക്കൾ ഒരു സെൻസിറ്റീവ് ഗ്രൂപ്പായതിനാലും വിഷബാധയ്ക്കുള്ള സാധ്യതയുള്ളതിനാലും, പാൽപ്പൊടി ഉപഭോഗത്തിന്റെ സുരക്ഷ ആരോഗ്യത്തിന് വളരെ പ്രധാനമാണ്. ചൈനീസ് ശിശുക്കൾക്കിടയിൽ മെലാമൈൻ വിഷബാധ കേസിന് ശേഷം, ലോകമെമ്പാടുമുള്ള രാജ്യങ്ങൾ ഈ വിഷയത്തിൽ ശ്രദ്ധ ചെലുത്തിയിട്ടുണ്ട്, കൂടാതെ ഈ പ്രദേശത്തിന്റെ സംവേദനക്ഷമതയും വർദ്ധിച്ചു. അതിനാൽ, ശിശുക്കളുടെ ആരോഗ്യം സംരക്ഷിക്കുന്നതിന് ശിശു ഫോർമുല ഉൽപാദനത്തിന്റെ നിയന്ത്രണം ശക്തിപ്പെടുത്തേണ്ടത് വളരെ പ്രധാനമാണ്. ഭക്ഷണത്തിലെ മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (HPLC), ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, സെൻസറി രീതി, സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി, ആന്റിജൻ-ആന്റിബോഡി എൻസൈം-ലിങ്ക്ഡ് ഇമ്മ്യൂണോസോർബന്റ് അസ്സേ എന്നിവയുൾപ്പെടെ വിവിധ രീതികളുണ്ട്. 2007-ൽ, യുഎസ് ഫുഡ് ആൻഡ് ഡ്രഗ് അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ (FDA) ഭക്ഷണത്തിലെ മെലാമൈൻ, സയനൂറിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ നിർണ്ണയത്തിനായി ഒരു HPLC രീതി വികസിപ്പിക്കുകയും പ്രസിദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്തു, ഇത് മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കം നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള ഏറ്റവും ഫലപ്രദമായ രീതിയാണ്17.
പുതിയ ഇൻഫ്രാറെഡ് സ്പെക്ട്രോസ്കോപ്പി ടെക്നിക് ഉപയോഗിച്ച് അളക്കുന്ന ശിശു ഫോർമുലയിലെ മെലാമൈൻ സാന്ദ്രത കിലോഗ്രാമിന് 0.33 മുതൽ 0.96 മില്ലിഗ്രാം വരെയാണ് (mg kg-1). 18 ശ്രീലങ്കയിൽ നടത്തിയ ഒരു പഠനത്തിൽ, മുഴുവൻ പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ അളവ് 0.39 മുതൽ 0.84 mg kg-1 വരെയാണെന്ന് കണ്ടെത്തി. കൂടാതെ, ഇറക്കുമതി ചെയ്ത ശിശു ഫോർമുല സാമ്പിളുകളിൽ യഥാക്രമം 0.96 ഉം 0.94 mg/kg ഉം എന്ന നിലയിൽ ഏറ്റവും ഉയർന്ന അളവിൽ മെലാമൈൻ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്. ഈ അളവുകൾ നിയന്ത്രണ പരിധിക്ക് താഴെയാണ് (1 mg/kg), എന്നാൽ ഉപഭോക്തൃ സുരക്ഷയ്ക്കായി ഒരു നിരീക്ഷണ പരിപാടി ആവശ്യമാണ്. 19
ഇറാനിയൻ ശിശു ഫോർമുലകളിലെ മെലാമൈനിന്റെ അളവ് നിരവധി പഠനങ്ങൾ പരിശോധിച്ചിട്ടുണ്ട്. ഏകദേശം 65% സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ശരാശരി 0.73 mg/kg ഉം പരമാവധി 3.63 mg/kg ഉം ആണ്. മറ്റൊരു പഠനം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തത് ശിശു ഫോർമുലയിലെ മെലാമൈനിന്റെ അളവ് 0.35 മുതൽ 3.40 μg/kg വരെയും ശരാശരി 1.38 μg/kg ഉം ആണെന്നാണ്. മൊത്തത്തിൽ, ഇറാനിയൻ ശിശു ഫോർമുലകളിലെ മെലാമൈനിന്റെ സാന്നിധ്യവും അളവും വിവിധ പഠനങ്ങളിൽ വിലയിരുത്തിയിട്ടുണ്ട്, ചില സാമ്പിളുകളിൽ മെലാമൈൻ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നത് നിയന്ത്രണ അധികാരികൾ നിശ്ചയിച്ച പരമാവധി പരിധി (2.5 mg/kg/feed) കവിയുന്നു.
ഭക്ഷ്യ വ്യവസായത്തിൽ പാൽപ്പൊടിയുടെ പ്രത്യക്ഷവും പരോക്ഷവുമായ വലിയ ഉപഭോഗവും കുട്ടികൾക്ക് ഭക്ഷണം നൽകുന്നതിൽ ശിശു ഫോർമുലയുടെ പ്രത്യേക പ്രാധാന്യവും കണക്കിലെടുത്ത്, പാൽപ്പൊടിയിലും ശിശു ഫോർമുലയിലും മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തൽ രീതി സാധൂകരിക്കുക എന്നതായിരുന്നു ഈ പഠനം ലക്ഷ്യമിടുന്നത്. വാസ്തവത്തിൽ, ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (HPLC), അൾട്രാവയലറ്റ് (UV) കണ്ടെത്തൽ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ മായം ചേർക്കൽ കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഒരു ദ്രുതവും ലളിതവും കൃത്യവുമായ അളവ് രീതി വികസിപ്പിക്കുക എന്നതായിരുന്നു ഈ പഠനത്തിന്റെ ആദ്യ ലക്ഷ്യം; രണ്ടാമതായി, ഇറാനിയൻ വിപണിയിൽ വിൽക്കുന്ന ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കം നിർണ്ണയിക്കുക എന്നതായിരുന്നു ഈ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം.
മെലാമൈൻ വിശകലനത്തിനായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഉപകരണങ്ങൾ ഭക്ഷ്യ ഉൽപാദന സ്ഥലത്തെ ആശ്രയിച്ച് വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു. പാലിലും ശിശു ഫോർമുലയിലും മെലാമൈൻ അവശിഷ്ടങ്ങൾ അളക്കാൻ ഒരു സെൻസിറ്റീവും വിശ്വസനീയവുമായ HPLC-UV വിശകലന രീതി ഉപയോഗിച്ചു. മെലാമൈൻ അളക്കലിനെ തടസ്സപ്പെടുത്തുന്ന വിവിധ പ്രോട്ടീനുകളും കൊഴുപ്പുകളും പാലുൽപ്പന്നങ്ങളിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. അതിനാൽ, സൺ തുടങ്ങിയവർ 22 സൂചിപ്പിച്ചതുപോലെ, ഉപകരണ വിശകലനത്തിന് മുമ്പ് ഉചിതമായതും ഫലപ്രദവുമായ ഒരു ക്ലീനപ്പ് തന്ത്രം ആവശ്യമാണ്. ഈ പഠനത്തിൽ, ഞങ്ങൾ ഡിസ്പോസിബിൾ സിറിഞ്ച് ഫിൽട്ടറുകൾ ഉപയോഗിച്ചു. ഈ പഠനത്തിൽ, ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ വേർതിരിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ഒരു C18 കോളം ഉപയോഗിച്ചു. മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ക്രോമാറ്റോഗ്രാം ചിത്രം 1 കാണിക്കുന്നു. കൂടാതെ, 0.1–1.2 mg/kg മെലാമൈൻ അടങ്ങിയ സാമ്പിളുകളുടെ വീണ്ടെടുക്കൽ 95% മുതൽ 109% വരെയാണ്, റിഗ്രഷൻ സമവാക്യം y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925) ആയിരുന്നു, കൂടാതെ ആപേക്ഷിക സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡീവിയേഷൻ (RSD) മൂല്യങ്ങൾ 0.8 മുതൽ 2% വരെയാണ്. ലഭ്യമായ ഡാറ്റ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് പഠനവിധേയമായ സാന്ദ്രത ശ്രേണിയിൽ (പട്ടിക 1) ഈ രീതി വിശ്വസനീയമാണെന്ന്. മെലാമൈനിന്റെ ഉപകരണ കണ്ടെത്തൽ പരിധി (LOD) ഉം അളവെടുപ്പിന്റെ പരിധി (LOQ) ഉം യഥാക്രമം 1 μg mL−1 ഉം 3 μg mL−1 ഉം ആയിരുന്നു. കൂടാതെ, മെലാമൈനിന്റെ UV സ്പെക്ട്രം 242 nm-ൽ ഒരു ആഗിരണം ബാൻഡ് പ്രദർശിപ്പിച്ചു. കണ്ടെത്തൽ രീതി സെൻസിറ്റീവ്, വിശ്വസനീയവും കൃത്യവുമാണ്. മെലാമൈൻ ലെവലിന്റെ പതിവ് നിർണ്ണയത്തിന് ഈ രീതി ഉപയോഗിക്കാം.
സമാനമായ ഫലങ്ങൾ നിരവധി എഴുത്തുകാർ പ്രസിദ്ധീകരിച്ചിട്ടുണ്ട്. പാലുൽപ്പന്നങ്ങളിലെ മെലാമൈൻ വിശകലനത്തിനായി ഒരു ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി-ഫോട്ടോഡയോഡ് അറേ (HPLC) രീതി വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു. 240 nm-ൽ പാൽപ്പൊടിക്ക് 340 μg kg−1 ഉം ശിശു ഫോർമുലയ്ക്ക് 280 μg kg−1 ഉം ആയിരുന്നു അളവെടുപ്പിന്റെ കുറഞ്ഞ പരിധികൾ. HPLC-യിൽ ശിശു ഫോർമുലയിൽ മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തിയിട്ടില്ലെന്ന് ഫിലാസി തുടങ്ങിയവർ (2012) റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. എന്നിരുന്നാലും, പാൽപ്പൊടി സാമ്പിളുകളിൽ 8% ലും 0.505–0.86 mg/kg എന്ന അളവിൽ മെലാമൈൻ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്. ടിറ്റിൽമിറ്റ് തുടങ്ങിയവർ സമാനമായ ഒരു പഠനം നടത്തി, ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി-മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രി/MS (HPLC-MS/MS) വഴി ശിശു ഫോർമുലയിലെ മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കം (സാമ്പിൾ നമ്പർ: 72) ഏകദേശം 0.0431–0.346 mg kg−1 ആണെന്ന് കണ്ടെത്തി. വെങ്കടസാമി തുടങ്ങിയവർ നടത്തിയ ഒരു പഠനത്തിൽ. (2010), ശിശു ഫോർമുലയിലും പാലിലും മെലാമൈൻ കണക്കാക്കാൻ ഒരു ഗ്രീൻ കെമിസ്ട്രി സമീപനവും (അസെറ്റോണിട്രൈൽ ഇല്ലാതെ) റിവേഴ്‌സ്ഡ്-ഫേസ് ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (RP-HPLC) ഉപയോഗിച്ചു. സാമ്പിൾ കോൺസൺട്രേഷൻ പരിധി 1.0 മുതൽ 80 g/mL വരെയായിരുന്നു, പ്രതികരണം രേഖീയമായിരുന്നു (r > 0.999). 5–40 g/mL എന്ന കോൺസൺട്രേഷൻ പരിധിയേക്കാൾ 97.2–101.2 ന്റെ വീണ്ടെടുക്കലുകൾ ഈ രീതി കാണിച്ചു, പുനരുൽപാദനക്ഷമത 1.0% ൽ താഴെയായിരുന്നു ആപേക്ഷിക സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡീവിയേഷൻ. കൂടാതെ, നിരീക്ഷിച്ച LOD ഉം LOQ ഉം യഥാക്രമം 0.1 g mL−1 ഉം 0.2 g mL−124 ഉം ആയിരുന്നു. HPLC-UV ഉപയോഗിച്ച് പശുവിൻ പാലിലും പാൽ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ശിശു ഫോർമുലയിലും മെലാമൈൻ മലിനീകരണം നിർണ്ണയിച്ചു. മെലാമൈൻ സാന്ദ്രത < 0.2 മുതൽ 2.52 mg kg−1 വരെയാണ്. HPLC-UV രീതിയുടെ ലീനിയർ ഡൈനാമിക് ശ്രേണി പശുവിൻ പാലിന് 0.05 മുതൽ 2.5 mg kg−1 വരെയും, <15% പ്രോട്ടീൻ മാസ് ഫ്രാക്ഷനുള്ള ശിശു ഫോർമുലയ്ക്ക് 0.13 മുതൽ 6.25 mg kg−1 വരെയും, 15% പ്രോട്ടീൻ മാസ് ഫ്രാക്ഷനുള്ള ശിശു ഫോർമുലയ്ക്ക് 0.25 മുതൽ 12.5 mg kg−1 വരെയും ആയിരുന്നു. LOD (ഒപ്പം LOQ) ഫലങ്ങൾ പശുവിൻ പാലിന് 0.03 mg kg−1 (0.09 mg kg−1), <15% പ്രോട്ടീൻ ശിശു ഫോർമുലയ്ക്ക് 0.06 mg kg−1 (0.18 mg kg−1), 15% പ്രോട്ടീൻ ശിശു ഫോർമുലയ്ക്ക് 0.12 mg kg−1 (0.36 mg kg−1) എന്നിങ്ങനെയായിരുന്നു, LOD, LOQ എന്നിവയ്ക്ക് യഥാക്രമം 3 ഉം 1025 ഉം സിഗ്നൽ-ടു-നോയ്‌സ് അനുപാതം ഉണ്ടായിരുന്നു. HPLC/DMD ഉപയോഗിച്ച് ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടി സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ അളവ് Diebes et al. (2012) പരിശോധിച്ചു. ശിശു ഫോർമുലയിൽ, ഏറ്റവും കുറഞ്ഞതും ഉയർന്നതുമായ അളവ് യഥാക്രമം 9.49 mg kg−1 ഉം 258 mg kg−1 ഉം ആയിരുന്നു. കണ്ടെത്തലിന്റെ പരിധി (LOD) 0.05 mg kg−1 ആയിരുന്നു.
ഫ്യൂറിയർ ട്രാൻസ്ഫോം ഇൻഫ്രാറെഡ് സ്പെക്ട്രോസ്കോപ്പി (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1) പ്രകാരം ശിശു ഫോർമുലയിലെ മെലാമൈൻ അവശിഷ്ടങ്ങൾ 0.002–2 mg kg−1 പരിധിയിലാണെന്ന് ജാവൈദ് തുടങ്ങിയവർ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. മെലാമൈൻ കണക്കാക്കാൻ റെസായി തുടങ്ങിയവർ ഒരു HPLC-DDA (λ = 220 nm) രീതി നിർദ്ദേശിച്ചു, പാൽപ്പൊടിക്ക് 0.08 μg mL−1 ന്റെ LOQ നേടി, ഇത് ഈ പഠനത്തിൽ ലഭിച്ചതിനേക്കാൾ കുറവായിരുന്നു. സോളിഡ് ഫേസ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ (SPE) വഴി ദ്രാവക പാലിൽ മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തുന്നതിനായി സൺ തുടങ്ങിയവർ ഒരു RP-HPLC-DAD വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു. അവർക്ക് യഥാക്രമം 18 ഉം 60 μg kg−128 ഉം LOD ഉം ലഭിച്ചു, ഇത് നിലവിലെ പഠനത്തേക്കാൾ കൂടുതൽ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്. മോണ്ടെസാനോ തുടങ്ങിയവർ. 0.05–3 mg/kg എന്ന പരിധിയിലുള്ള പ്രോട്ടീൻ സപ്ലിമെന്റുകളിലെ മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കം വിലയിരുത്തുന്നതിനുള്ള HPLC-DMD രീതിയുടെ ഫലപ്രാപ്തി സ്ഥിരീകരിച്ചു, ഇത് ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച രീതിയേക്കാൾ സെൻസിറ്റീവ് കുറവായിരുന്നു29.
നിസ്സംശയമായും, വിവിധ സാമ്പിളുകളിലെ മലിനീകരണ വസ്തുക്കൾ നിരീക്ഷിച്ച് പരിസ്ഥിതിയെ സംരക്ഷിക്കുന്നതിൽ വിശകലന ലബോറട്ടറികൾ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, വിശകലന സമയത്ത് ധാരാളം റിയാക്ടറുകളുടെയും ലായകങ്ങളുടെയും ഉപയോഗം അപകടകരമായ അവശിഷ്ടങ്ങളുടെ രൂപീകരണത്തിന് കാരണമായേക്കാം. അതിനാൽ, ഓപ്പറേറ്റർമാരിലും പരിസ്ഥിതിയിലും വിശകലന നടപടിക്രമങ്ങളുടെ പ്രതികൂല ഫലങ്ങൾ കുറയ്ക്കുന്നതിനോ ഇല്ലാതാക്കുന്നതിനോ 2000-ൽ ഗ്രീൻ അനലിറ്റിക്കൽ കെമിസ്ട്രി (GAC) വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു. ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, കാപ്പിലറി ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, എൻസൈം-ലിങ്ക്ഡ് ഇമ്മ്യൂണോസോർബന്റ് അസ്സേ (ELISA) എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള പരമ്പരാഗത മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തൽ രീതികൾ മെലാമൈൻ തിരിച്ചറിയാൻ ഉപയോഗിച്ചുവരുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, നിരവധി കണ്ടെത്തൽ രീതികളിൽ, ഇലക്ട്രോകെമിക്കൽ സെൻസറുകൾ അവയുടെ മികച്ച സംവേദനക്ഷമത, സെലക്റ്റിവിറ്റി, ദ്രുത വിശകലന സമയം, ഉപയോക്തൃ-സൗഹൃദ സവിശേഷതകൾ എന്നിവ കാരണം വളരെയധികം ശ്രദ്ധ ആകർഷിച്ചു. നാനോമെറ്റീരിയലുകൾ സമന്വയിപ്പിക്കുന്നതിന് ഗ്രീൻ നാനോ ടെക്നോളജി ജൈവ പാതകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് അപകടകരമായ മാലിന്യങ്ങളുടെയും ഊർജ്ജ ഉപഭോഗത്തിന്റെയും ഉത്പാദനം കുറയ്ക്കുകയും അതുവഴി സുസ്ഥിര രീതികൾ നടപ്പിലാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദ വസ്തുക്കളിൽ നിന്ന് നിർമ്മിച്ച നാനോകോമ്പോസിറ്റുകൾ, മെലാമൈൻ പോലുള്ള പദാർത്ഥങ്ങൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന് ബയോസെൻസറുകളിൽ ഉപയോഗിക്കാം32,33,34.
പരമ്പരാഗത എക്സ്ട്രാക്ഷൻ രീതികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഉയർന്ന ഊർജ്ജ കാര്യക്ഷമതയും സുസ്ഥിരതയും കാരണം സോളിഡ്-ഫേസ് മൈക്രോ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ (SPME) ഫലപ്രദമായി ഉപയോഗിക്കപ്പെടുന്നുണ്ടെന്ന് പഠനം കാണിക്കുന്നു. SPME യുടെ പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദവും ഊർജ്ജ കാര്യക്ഷമതയും വിശകലന രസതന്ത്രത്തിലെ പരമ്പരാഗത എക്സ്ട്രാക്ഷൻ രീതികൾക്ക് മികച്ച ഒരു ബദലായി ഇതിനെ മാറ്റുകയും സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കുന്നതിന് കൂടുതൽ സുസ്ഥിരവും കാര്യക്ഷമവുമായ രീതി നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു35.
2013-ൽ, വു തുടങ്ങിയവരും ചേർന്ന് ഉയർന്ന സെൻസിറ്റീവും സെലക്ടീവുമായ ഒരു സർഫേസ് പ്ലാസ്മോൺ റെസൊണൻസ് (മിനി-എസ്പിആർ) ബയോസെൻസർ വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു, ഇത് മെലാമൈനും ആന്റി-മെലാമൈൻ ആന്റിബോഡികളും തമ്മിലുള്ള സംയോജനം ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ഇമ്മ്യൂണോഅസെ ഉപയോഗിച്ച് ശിശു ഫോർമുലയിലെ മെലാമൈൻ വേഗത്തിൽ കണ്ടെത്തുന്നു. എസ്പിആർ ബയോസെൻസർ ഒരു ഇമ്മ്യൂണോഅസെയുമായി (മെലാമൈൻ-കൺജുഗേറ്റഡ് ബോവിൻ സെറം ആൽബുമിൻ ഉപയോഗിച്ച്) സംയോജിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നത് ഉപയോഗിക്കാൻ എളുപ്പമുള്ളതും കുറഞ്ഞ ചെലവുള്ളതുമായ ഒരു സാങ്കേതികവിദ്യയാണ്, ഇതിന്റെ കണ്ടെത്തൽ പരിധി 0.02 μg mL-136 മാത്രമാണ്.
വാണിജ്യ സാമ്പിളുകളിൽ മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തുന്നതിന് നാസിരിയും അബ്ബാസിയനും ഗ്രാഫീൻ ഓക്സൈഡ്-കൈറ്റോസാൻ കമ്പോസിറ്റുകളുമായി (GOCS) സംയോജിപ്പിച്ച് ഉയർന്ന ശേഷിയുള്ള പോർട്ടബിൾ സെൻസർ ഉപയോഗിച്ചു37. ഈ രീതി അൾട്രാ-ഹൈ സെലക്റ്റിവിറ്റി, കൃത്യത, പ്രതികരണം എന്നിവ കാണിച്ചു. GOCS സെൻസർ ശ്രദ്ധേയമായ സംവേദനക്ഷമത (239.1 μM−1), 0.01 മുതൽ 200 μM വരെയുള്ള രേഖീയ ശ്രേണി, 1.73 × 104 എന്ന അഫിനിറ്റി സ്ഥിരാങ്കം, 10 nM വരെ LOD എന്നിവ പ്രദർശിപ്പിച്ചു. മാത്രമല്ല, 2024-ൽ ചന്ദ്രശേഖർ തുടങ്ങിയവർ നടത്തിയ ഒരു പഠനം പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദപരവും ചെലവ് കുറഞ്ഞതുമായ ഒരു സമീപനമാണ് സ്വീകരിച്ചത്. പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദ രീതിയിൽ സിങ്ക് ഓക്സൈഡ് നാനോകണങ്ങൾ (ZnO-NP-കൾ) സമന്വയിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു റിഡ്യൂസിംഗ് ഏജന്റായി അവർ പപ്പായ തൊലി സത്ത് ഉപയോഗിച്ചു. തുടർന്ന്, ശിശു ഫോർമുലയിൽ മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനായി ഒരു സവിശേഷ മൈക്രോ-രാമൻ സ്പെക്ട്രോസ്കോപ്പി സാങ്കേതികത വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു. കാർഷിക മാലിന്യങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ZnO-NP-കൾ ഒരു വിലപ്പെട്ട ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ഉപകരണമായും മെലാമൈൻ നിരീക്ഷിക്കുന്നതിനും കണ്ടെത്തുന്നതിനുമുള്ള വിശ്വസനീയവും കുറഞ്ഞ ചെലവുള്ളതുമായ സാങ്കേതികവിദ്യയായും കഴിവ് തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്38.
അലിസാദെ തുടങ്ങിയവർ (2024) പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കാൻ വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആയ ഒരു ലോഹ-ഓർഗാനിക് ഫ്രെയിംവർക്ക് (MOF) ഫ്ലൂറസെൻസ് പ്ലാറ്റ്‌ഫോം ഉപയോഗിച്ചു. 3σ/S ഉപയോഗിച്ച് നിർണ്ണയിച്ച സെൻസറിന്റെ രേഖീയ ശ്രേണിയും താഴ്ന്ന കണ്ടെത്തൽ പരിധിയും യഥാക്രമം 40 മുതൽ 396.45 nM (25 μg kg−1 മുതൽ 0.25 mg kg−1 വരെ) 40 nM (25 μg kg−1 ന് തുല്യം) ആയിരുന്നു. ശിശു ഫോർമുലയിലും (1 mg kg−1) മറ്റ് ഭക്ഷണ/തീറ്റ സാമ്പിളുകളിലും (2.5 mg kg−1) മെലാമൈൻ തിരിച്ചറിയുന്നതിനായി നിശ്ചയിച്ചിട്ടുള്ള പരമാവധി അവശിഷ്ട നിലകളേക്കാൾ (MRLs) ഈ ശ്രേണി വളരെ താഴെയാണ്. ഫ്ലൂറസെന്റ് സെൻസർ (ടെർബിയം (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തുന്നതിൽ HPLC39 നെ അപേക്ഷിച്ച് ഉയർന്ന കൃത്യതയും കൂടുതൽ കൃത്യമായ അളക്കൽ ശേഷിയും പ്രകടമാക്കി. ഹരിത രസതന്ത്രത്തിലെ ബയോസെൻസറുകളും നാനോകോമ്പോസിറ്റുകളും കണ്ടെത്തൽ ശേഷി വർദ്ധിപ്പിക്കുക മാത്രമല്ല, സുസ്ഥിര വികസന തത്വങ്ങൾക്ക് അനുസൃതമായി പാരിസ്ഥിതിക അപകടങ്ങൾ കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള വിവിധ രീതികളിൽ ഗ്രീൻ കെമിസ്ട്രി തത്വങ്ങൾ പ്രയോഗിച്ചിട്ടുണ്ട്. ശിശു ഫോർമുല, ചൂടുവെള്ളം തുടങ്ങിയ സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് മെലാമൈൻ 40 കാര്യക്ഷമമായി വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനായി സിട്രിക് ആസിഡുമായി ക്രോസ്-ലിങ്ക് ചെയ്‌ത പ്രകൃതിദത്ത പോളാർ പോളിമർ β-സൈക്ലോഡെക്‌സ്ട്രിൻ ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ഗ്രീൻ ഡിസ്‌പെഴ്‌സീവ് സോളിഡ്-ഫേസ് മൈക്രോ എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ രീതി വികസിപ്പിക്കുക എന്നതാണ് ഒരു സമീപനം. പാൽ സാമ്പിളുകളിൽ മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കാൻ മറ്റൊരു രീതി മാന്നിച് പ്രതിപ്രവർത്തനം ഉപയോഗിക്കുന്നു. ഈ രീതി വിലകുറഞ്ഞതും പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദപരവും വളരെ കൃത്യവുമാണ്, 0.1–2.5 പിപിഎം എന്ന രേഖീയ ശ്രേണിയും കുറഞ്ഞ ഡിറ്റക്ഷൻ പരിധിയും 41 ഉം ഉണ്ട്. കൂടാതെ, ലിക്വിഡ് പാലിലും ശിശു ഫോർമുലയിലും മെലാമൈൻ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള ചെലവ് കുറഞ്ഞതും പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദവുമായ ഒരു രീതി യഥാക്രമം 1 പിപിഎം, 3.5 പിപിഎം എന്നീ ഉയർന്ന കൃത്യതയും കണ്ടെത്തൽ പരിധികളുമുള്ള ഫ്യൂറിയർ ട്രാൻസ്‌ഫോം ഇൻഫ്രാറെഡ് ട്രാൻസ്മിഷൻ സ്പെക്ട്രോസ്കോപ്പി ഉപയോഗിച്ച് വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു. മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള കാര്യക്ഷമവും സുസ്ഥിരവുമായ രീതികളുടെ വികസനത്തിന് ഗ്രീൻ കെമിസ്ട്രി തത്വങ്ങളുടെ പ്രയോഗം ഈ രീതികൾ തെളിയിക്കുന്നു.
മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തലിനായി നിരവധി പഠനങ്ങൾ നൂതന രീതികൾ നിർദ്ദേശിച്ചിട്ടുണ്ട്, ഉദാഹരണത്തിന് സോളിഡ്-ഫേസ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ, ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (HPLC)43, അതുപോലെ സങ്കീർണ്ണമായ പ്രീ-ട്രീറ്റ്‌മെന്റോ അയോൺ-പെയർ റിയാജന്റുകളോ ആവശ്യമില്ലാത്ത ഫാസ്റ്റ് ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (HPLC), അതുവഴി രാസ മാലിന്യത്തിന്റെ അളവ് കുറയ്ക്കുന്നു44. ഈ രീതികൾ പാലുൽപ്പന്നങ്ങളിലെ മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിന് കൃത്യമായ ഫലങ്ങൾ നൽകുക മാത്രമല്ല, ഹരിത രസതന്ത്രത്തിന്റെ തത്വങ്ങൾ പാലിക്കുകയും അപകടകരമായ രാസവസ്തുക്കളുടെ ഉപയോഗം കുറയ്ക്കുകയും വിശകലന പ്രക്രിയയുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള പാരിസ്ഥിതിക ആഘാതം കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
വ്യത്യസ്ത ബ്രാൻഡുകളുടെ നാൽപ്പത് സാമ്പിളുകൾ മൂന്ന് തവണ പരീക്ഷിച്ചു, ഫലങ്ങൾ പട്ടിക 2 ൽ അവതരിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു. ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടി സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ അളവ് യഥാക്രമം 0.001 മുതൽ 0.004 mg/kg വരെയും 0.001 മുതൽ 0.095 mg/kg വരെയും ആയിരുന്നു. ശിശു ഫോർമുല ഉപയോഗിക്കുന്ന മൂന്ന് പ്രായക്കാർക്കിടയിൽ കാര്യമായ മാറ്റങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല. കൂടാതെ, 80% പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തിയിരുന്നു, എന്നാൽ 65% ശിശു ഫോർമുലകളിലും മെലാമൈൻ കലർന്നിരുന്നു.
വ്യാവസായിക പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈൻ അളവ് ശിശു ഫോർമുലയേക്കാൾ കൂടുതലായിരുന്നു, വ്യത്യാസം ഗണ്യമായിരുന്നു (p<0.05) (ചിത്രം 2).
ലഭിച്ച ഫലങ്ങൾ FDA നിശ്ചയിച്ച പരിധിക്ക് താഴെയായിരുന്നു (1 ഉം 2.5 mg/kg ഉം താഴെ). കൂടാതെ, ഫലങ്ങൾ CAC (2010) ഉം EU45,46 ഉം നിശ്ചയിച്ച പരിധികൾക്ക് അനുസൃതമാണ്, അതായത് അനുവദനീയമായ പരമാവധി പരിധി ശിശു ഫോർമുലയ്ക്ക് 1 mg kg-1 ഉം പാലുൽപ്പന്നങ്ങൾക്ക് 2.5 mg kg-1 ഉം ആണ്.
2023-ൽ ഘാനതി തുടങ്ങിയവർ നടത്തിയ ഒരു പഠനമനുസരിച്ച്, ഇറാനിലെ വിവിധ തരം പായ്ക്ക് ചെയ്ത പാലിലെ മെലാമൈൻ അളവ് 50.7 മുതൽ 790 μg kg−1 വരെയാണ്. അവയുടെ ഫലങ്ങൾ FDA അനുവദനീയമായ പരിധിക്ക് താഴെയായിരുന്നു. ഞങ്ങളുടെ ഫലങ്ങൾ Shoder et al.48, Rima et al.49 എന്നിവയേക്കാൾ കുറവാണ്. ELISA നിർണ്ണയിക്കുന്ന പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈൻ അളവ് (n=49) 0.5 മുതൽ 5.5 mg/kg വരെയാണെന്ന് Shoder et al. (2010) കണ്ടെത്തി. ഫ്ലൂറസെൻസ് സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി ഉപയോഗിച്ച് പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈൻ അവശിഷ്ടങ്ങൾ വിശകലനം ചെയ്ത റിമ തുടങ്ങിയവർ പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈൻ അളവ് 0.72–5.76 mg/kg ആണെന്ന് കണ്ടെത്തി. ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (LC/MS) ഉപയോഗിച്ച് ശിശു ഫോർമുലയിലെ മെലാമൈൻ അളവ് (n=94) നിരീക്ഷിക്കുന്നതിനായി 2011-ൽ കാനഡയിൽ ഒരു പഠനം നടത്തി. മെലാമൈൻ സാന്ദ്രത സ്വീകാര്യമായ പരിധിക്ക് താഴെയാണെന്ന് കണ്ടെത്തി (പ്രാഥമിക മാനദണ്ഡം: 0.5 mg kg−1). കണ്ടെത്തിയ വ്യാജ മെലാമൈൻ അളവ് പ്രോട്ടീൻ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ ഉപയോഗിച്ച ഒരു തന്ത്രമായിരിക്കാൻ സാധ്യതയില്ല. എന്നിരുന്നാലും, രാസവളങ്ങളുടെ ഉപയോഗം, കണ്ടെയ്നർ ഉള്ളടക്കങ്ങളുടെ സ്ഥലംമാറ്റം അല്ലെങ്കിൽ സമാനമായ ഘടകങ്ങൾ എന്നിവയാൽ ഇത് വിശദീകരിക്കാൻ കഴിയില്ല. കൂടാതെ, കാനഡയിലേക്ക് ഇറക്കുമതി ചെയ്യുന്ന പാൽപ്പൊടിയിലെ മെലാമൈനിന്റെ ഉറവിടം വെളിപ്പെടുത്തിയിട്ടില്ല50.
2013-ൽ ഇറാനിയൻ വിപണിയിലെ പാൽപ്പൊടിയിലും ദ്രാവക പാലിലും മെലാമൈൻ അളവ് ഹസാനി തുടങ്ങിയവർ അളന്നു, സമാനമായ ഫലങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. ഒരു ബ്രാൻഡ് പാൽപ്പൊടിയും ദ്രാവക പാലും ഒഴികെ, മറ്റെല്ലാ സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ കലർന്നിട്ടുണ്ടെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, പാൽപ്പൊടിയിൽ 1.50 മുതൽ 30.32 μg g−1 വരെയും പാലിൽ 0.11 മുതൽ 1.48 μg ml−1 വരെയും അളവ് ഉണ്ടായിരുന്നു. ശ്രദ്ധേയമായി, ഒരു സാമ്പിളിലും സയനൂറിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തിയില്ല, ഇത് ഉപഭോക്താക്കൾക്ക് മെലാമൈൻ വിഷബാധയ്ക്കുള്ള സാധ്യത കുറയ്ക്കുന്നു. 51 പാൽപ്പൊടി അടങ്ങിയ ചോക്ലേറ്റ് ഉൽപ്പന്നങ്ങളിലെ മെലാമൈൻ സാന്ദ്രത മുൻ പഠനങ്ങൾ വിലയിരുത്തിയിട്ടുണ്ട്. ഇറക്കുമതി ചെയ്ത സാമ്പിളുകളിൽ ഏകദേശം 94% ഉം ഇറാനിയൻ സാമ്പിളുകളിൽ 77% ഉം മെലാമൈൻ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്. ഇറക്കുമതി ചെയ്ത സാമ്പിളുകളിൽ മെലാമൈൻ അളവ് 0.032 മുതൽ 2.692 mg/kg വരെയായിരുന്നു, അതേസമയം ഇറാനിയൻ സാമ്പിളുകളിൽ 0.013 മുതൽ 2.600 mg/kg വരെയായിരുന്നു. മൊത്തത്തിൽ, 85% സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തി, എന്നാൽ ഒരു പ്രത്യേക ബ്രാൻഡിൽ മാത്രമേ അനുവദനീയമായ പരിധിക്ക് മുകളിലുള്ള അളവ് ഉണ്ടായിരുന്നുള്ളൂ. ടിറ്റിൽമിയർ തുടങ്ങിയവർ പാൽപ്പൊടിയിൽ മെലാമൈൻ അളവ് 0.00528 മുതൽ 0.0122 mg/kg വരെയാണെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു.
മൂന്ന് പ്രായ വിഭാഗങ്ങൾക്കായുള്ള അപകടസാധ്യത വിലയിരുത്തൽ ഫലങ്ങൾ പട്ടിക 3 സംഗ്രഹിക്കുന്നു. എല്ലാ പ്രായ വിഭാഗങ്ങളിലും അപകടസാധ്യത 1 ൽ താഴെയായിരുന്നു. അതിനാൽ, ശിശു ഫോർമുലയിൽ മെലാമൈൻ ചേർക്കുന്നതിൽ നിന്ന് കാൻസർ ഉണ്ടാക്കാത്ത ആരോഗ്യ അപകടങ്ങളൊന്നുമില്ല.
പാലുൽപ്പന്നങ്ങളിൽ കുറഞ്ഞ അളവിലുള്ള മലിനീകരണം ഉണ്ടാകുന്നത് തയ്യാറാക്കൽ സമയത്ത് മനഃപൂർവ്വമല്ലാത്ത മലിനീകരണം മൂലമാകാം, അതേസമയം ഉയർന്ന അളവ് മനഃപൂർവ്വം ചേർക്കുന്ന ഘടകങ്ങൾ മൂലമാകാം. കൂടാതെ, കുറഞ്ഞ മെലാമൈൻ അളവിലുള്ള പാലുൽപ്പന്നങ്ങൾ കഴിക്കുന്നതിലൂടെ മനുഷ്യന്റെ ആരോഗ്യത്തിന് മൊത്തത്തിലുള്ള അപകടസാധ്യത കുറവാണെന്ന് കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. മെലാമൈൻ അളവ് കുറവുള്ള അത്തരം ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ കഴിക്കുന്നത് ഉപഭോക്തൃ ആരോഗ്യത്തിന് ഒരു അപകടവും ഉണ്ടാക്കുന്നില്ലെന്ന് നിഗമനം ചെയ്യാം52.
ക്ഷീര വ്യവസായത്തിൽ, പ്രത്യേകിച്ച് പൊതുജനാരോഗ്യം സംരക്ഷിക്കുന്നതിൽ, ഭക്ഷ്യസുരക്ഷാ മാനേജ്മെന്റിന്റെ പ്രാധാന്യം കണക്കിലെടുക്കുമ്പോൾ, പാൽപ്പൊടിയിലും ശിശു ഫോർമുലയിലും മെലാമൈൻ അളവും അവശിഷ്ടങ്ങളും വിലയിരുത്തുന്നതിനും താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിനുമുള്ള ഒരു രീതി വികസിപ്പിക്കുകയും സാധൂകരിക്കുകയും ചെയ്യേണ്ടത് അത്യന്താപേക്ഷിതമാണ്. ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിന് ലളിതവും കൃത്യവുമായ ഒരു HPLC-UV സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് രീതി വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു. അതിന്റെ വിശ്വാസ്യതയും കൃത്യതയും ഉറപ്പാക്കാൻ ഈ രീതി സാധൂകരിച്ചു. രീതിയുടെ കണ്ടെത്തലും അളവ് പരിധികളും ശിശു ഫോർമുലയിലും പാൽപ്പൊടിയിലും മെലാമൈൻ അളവ് അളക്കാൻ പര്യാപ്തമാണെന്ന് കാണിച്ചു. ഞങ്ങളുടെ ഡാറ്റ അനുസരിച്ച്, മിക്ക ഇറാനിയൻ സാമ്പിളുകളിലും മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തി. കണ്ടെത്തിയ എല്ലാ മെലാമൈൻ അളവുകളും CAC നിശ്ചയിച്ചിട്ടുള്ള പരമാവധി അനുവദനീയമായ പരിധിക്ക് താഴെയായിരുന്നു, ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ഈ തരത്തിലുള്ള പാലുൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ഉപഭോഗം മനുഷ്യന്റെ ആരോഗ്യത്തിന് അപകടമുണ്ടാക്കുന്നില്ലെന്ന്.
ഉപയോഗിച്ച എല്ലാ രാസ റിയാജന്റുകളും അനലിറ്റിക്കൽ ഗ്രേഡിലുള്ളവയായിരുന്നു: മെലാമൈൻ (2,4,6-ട്രയാമിനോ-1,3,5-ട്രയാസൈൻ) 99% ശുദ്ധമായത് (സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്, സെന്റ് ലൂയിസ്, MO); HPLC-ഗ്രേഡ് അസെറ്റോണിട്രൈൽ (മെർക്ക്, ഡാർംസ്റ്റാഡ്, ജർമ്മനി); അൾട്രാപ്യുവർ വെള്ളം (മിലിപോർ, മോർഫ്ഹൈം, ഫ്രാൻസ്). ഡിസ്പോസിബിൾ സിറിഞ്ച് ഫിൽട്ടറുകൾ (ക്രോമാഫിൽ എക്സ്ട്രാ പിവിഡിഎഫ്-45/25, സുഷിര വലുപ്പം 0.45 μm, മെംബ്രൻ വ്യാസം 25 മില്ലീമീറ്റർ) (മാച്ചെറി-നാഗൽ, ഡ്യൂറൻ, ജർമ്മനി).
സാമ്പിളുകൾ തയ്യാറാക്കാൻ ഒരു അൾട്രാസോണിക് ബാത്ത് (എൽമ, ജർമ്മനി), ഒരു സെൻട്രിഫ്യൂജ് (ബെക്ക്മാൻ കോൾട്ടർ, ക്രെഫെൽഡ്, ജർമ്മനി), HPLC (KNAUER, ജർമ്മനി) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ചു.
ഒരു UV ഡിറ്റക്ടർ ഘടിപ്പിച്ച ഒരു ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫ് (KNAUER, ജർമ്മനി) ഉപയോഗിച്ചു. HPLC വിശകലന വ്യവസ്ഥകൾ ഇപ്രകാരമായിരുന്നു: ODS-3 C18 അനലിറ്റിക്കൽ കോളം (4.6 mm × 250 mm, കണികാ വലിപ്പം 5 μm) (MZ, ജർമ്മനി) ഘടിപ്പിച്ച ഒരു UHPLC അൾട്ടിമേറ്റ് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ചു. HPLC എലൂയന്റ് (മൊബൈൽ ഘട്ടം) 1 mL min-1 ഫ്ലോ റേറ്റ് ഉള്ള ഒരു TFA/മെഥനോൾ മിശ്രിതം (450:50 mL) ആയിരുന്നു. കണ്ടെത്തൽ തരംഗദൈർഘ്യം 242 nm ആയിരുന്നു. കുത്തിവയ്പ്പ് അളവ് 100 μL ആയിരുന്നു, നിരയുടെ താപനില 20 °C ആയിരുന്നു. മരുന്നിന്റെ നിലനിർത്തൽ സമയം ദൈർഘ്യമേറിയതിനാൽ (15 മിനിറ്റ്), അടുത്ത കുത്തിവയ്പ്പ് 25 മിനിറ്റിനുശേഷം നടത്തണം. നിലനിർത്തൽ സമയവും മെലാമൈൻ മാനദണ്ഡങ്ങളുടെ UV സ്പെക്ട്രം കൊടുമുടിയും താരതമ്യം ചെയ്താണ് മെലാമൈൻ തിരിച്ചറിഞ്ഞത്.
മെലാമൈനിന്റെ ഒരു സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനി (10 μg/mL) വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് തയ്യാറാക്കി വെളിച്ചത്തിൽ നിന്ന് അകലെ ഒരു റഫ്രിജറേറ്ററിൽ (4 °C) സൂക്ഷിച്ചു. സ്റ്റോക്ക് ലായനി മൊബൈൽ ഫേസിൽ നേർപ്പിച്ച് വർക്കിംഗ് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനികൾ തയ്യാറാക്കി. ഓരോ സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനിയും HPLC-യിലേക്ക് 7 തവണ കുത്തിവച്ചു. നിർണ്ണയിച്ച പീക്ക് ഏരിയയുടെയും നിർണ്ണയിച്ച സാന്ദ്രതയുടെയും റിഗ്രഷൻ വിശകലനം വഴിയാണ് കാലിബ്രേഷൻ സമവാക്യം 10 ​​കണക്കാക്കിയത്.
ഇറാനിലെ പ്രാദേശിക സൂപ്പർമാർക്കറ്റുകളിൽ നിന്നും ഫാർമസികളിൽ നിന്നും വ്യത്യസ്ത പ്രായത്തിലുള്ള (0–6 മാസം, 6–12 മാസം, 12 മാസത്തിന് മുകളിൽ) ശിശുക്കൾക്ക് ഭക്ഷണം നൽകുന്നതിനായി വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ പശുവിൻ പാൽപ്പൊടി (20 സാമ്പിളുകൾ), വ്യത്യസ്ത ബ്രാൻഡുകളുടെ പശുവിൻ പാൽ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ശിശു ഫോർമുലയുടെ സാമ്പിളുകൾ (20 സാമ്പിളുകൾ) എന്നിവ വാങ്ങി, വിശകലനം വരെ റഫ്രിജറേറ്റഡ് താപനിലയിൽ (4 °C) സൂക്ഷിച്ചു. തുടർന്ന്, 1 ± 0.01 ഗ്രാം ഹോമോജെനൈസ്ഡ് പാൽപ്പൊടി തൂക്കി അസറ്റോണിട്രൈൽ:വെള്ളത്തിൽ (50:50, v/v; 5 mL) കലർത്തി. മിശ്രിതം 1 മിനിറ്റ് ഇളക്കി, തുടർന്ന് 30 മിനിറ്റ് അൾട്രാസോണിക് ബാത്തിൽ സോണിക്കേറ്റ് ചെയ്തു, ഒടുവിൽ 1 മിനിറ്റ് കുലുക്കി. തുടർന്ന് മിശ്രിതം 9000 × ഗ്രാം എന്ന അളവിൽ മുറിയിലെ താപനിലയിൽ 10 മിനിറ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്തു, സൂപ്പർനേറ്റന്റ് 0.45 μm സിറിഞ്ച് ഫിൽട്ടർ ഉപയോഗിച്ച് 2 മില്ലി ഓട്ടോസാംപ്ലർ വിയലിലേക്ക് ഫിൽട്ടർ ചെയ്തു. ഫിൽട്രേറ്റ് (250 μl) പിന്നീട് വെള്ളത്തിൽ (750 μl) കലർത്തി HPLC സിസ്റ്റത്തിലേക്ക് കുത്തിവച്ചു10,42.
രീതി സാധൂകരിക്കുന്നതിന്, ഒപ്റ്റിമൽ സാഹചര്യങ്ങളിൽ വീണ്ടെടുക്കൽ, കൃത്യത, കണ്ടെത്തലിന്റെ പരിധി (LOD), അളവിന്റെ പരിധി (LOQ), കൃത്യത എന്നിവ ഞങ്ങൾ നിർണ്ണയിച്ചു. അടിസ്ഥാന ശബ്ദ നിലയുടെ മൂന്നിരട്ടി പീക്ക് ഉയരമുള്ള സാമ്പിൾ ഉള്ളടക്കമാണ് LOD എന്ന് നിർവചിച്ചിരിക്കുന്നത്. മറുവശത്ത്, സിഗ്നൽ-ടു-നോയ്‌സ് അനുപാതത്തിന്റെ 10 മടങ്ങ് പീക്ക് ഉയരമുള്ള സാമ്പിൾ ഉള്ളടക്കമാണ് LOQ എന്ന് നിർവചിച്ചിരിക്കുന്നത്.
ഏഴ് ഡാറ്റ പോയിന്റുകൾ അടങ്ങിയ ഒരു കാലിബ്രേഷൻ കർവ് ഉപയോഗിച്ചാണ് ഉപകരണ പ്രതികരണം നിർണ്ണയിച്ചത്. വ്യത്യസ്ത മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ചു (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1, 1.2). മെലാമൈൻ കണക്കുകൂട്ടൽ പ്രക്രിയയുടെ രേഖീയത നിർണ്ണയിച്ചു. കൂടാതെ, ശൂന്യമായ സാമ്പിളുകളിൽ നിരവധി വ്യത്യസ്ത തലത്തിലുള്ള മെലാമൈൻ ചേർത്തു. ഒരു സ്റ്റാൻഡേർഡ് മെലാമൈൻ ലായനിയുടെ 0.1–1.2 μg mL−1 തുടർച്ചയായി ശിശു ഫോർമുലയിലേക്കും പൊടിച്ച പാൽ സാമ്പിളുകളിലേക്കും കുത്തിവച്ചുകൊണ്ടാണ് കാലിബ്രേഷൻ കർവ് നിർമ്മിച്ചത്, അതിന്റെ R2 = 0.9925. നടപടിക്രമത്തിന്റെ ആവർത്തനക്ഷമതയും പുനരുൽപാദനക്ഷമതയും ഉപയോഗിച്ച് കൃത്യത വിലയിരുത്തി, ആദ്യത്തെയും തുടർന്നുള്ള മൂന്ന് ദിവസങ്ങളിലും (ട്രിപ്പിളിൽ) സാമ്പിളുകൾ കുത്തിവച്ചുകൊണ്ടാണ് ഇത് നേടിയത്. ചേർത്ത മെലാമൈനിന്റെ മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതകൾക്ക് RSD % കണക്കാക്കിയാണ് രീതിയുടെ ആവർത്തനക്ഷമത വിലയിരുത്തിയത്. കൃത്യത നിർണ്ണയിക്കാൻ വീണ്ടെടുക്കൽ പഠനങ്ങൾ നടത്തി. ശിശു ഫോർമുലയുടെയും ഉണങ്ങിയ പാലിന്റെയും സാമ്പിളുകളിൽ മെലാമൈൻ സാന്ദ്രതയുടെ മൂന്ന് തലങ്ങളിൽ (0.1, 1.2, 2) വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ രീതിയിലൂടെയുള്ള വീണ്ടെടുക്കലിന്റെ അളവ് കണക്കാക്കി9,11,15.
ഇനിപ്പറയുന്ന ഫോർമുല ഉപയോഗിച്ചാണ് കണക്കാക്കിയ ദൈനംദിന ഉപഭോഗം (EDI) നിർണ്ണയിച്ചത്: EDI = Ci × Cc/BW.
Ci എന്നത് ശരാശരി മെലാമൈൻ ഉള്ളടക്കമാണ്, Cc എന്നത് പാൽ ഉപഭോഗവും BW എന്നത് കുട്ടികളുടെ ശരാശരി ഭാരവുമാണ്.
SPSS 24 ഉപയോഗിച്ചാണ് ഡാറ്റ വിശകലനം നടത്തിയത്. കോൾമോഗോറോവ്-സ്മിർനോവ് ടെസ്റ്റ് ഉപയോഗിച്ചാണ് സാധാരണത്വം പരിശോധിച്ചത്; എല്ലാ ഡാറ്റയും നോൺപാരാമെട്രിക് ടെസ്റ്റുകളായിരുന്നു (p = 0). അതിനാൽ, ഗ്രൂപ്പുകൾ തമ്മിലുള്ള കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ ക്രുസ്കാൽ-വാലിസ് ടെസ്റ്റും മാൻ-വിറ്റ്നി ടെസ്റ്റും ഉപയോഗിച്ചു.
ഇംഗൽഫിംഗർ, ജൂനിയർ. മെലാമൈനും ആഗോള ഭക്ഷ്യ മലിനീകരണത്തിൽ അതിന്റെ സ്വാധീനവും. ന്യൂ ഇംഗ്ലണ്ട് ജേണൽ ഓഫ് മെഡിസിൻ 359(26), 2745–2748 (2008).
ലിഞ്ച്, ആർ‌എ, തുടങ്ങിയവർ. കുട്ടികളുടെ പാത്രങ്ങളിലെ മെലാമൈൻ മൈഗ്രേഷനിൽ pH ന്റെ പ്രഭാവം. ഇന്റർനാഷണൽ ജേണൽ ഓഫ് ഫുഡ് കണ്ടമിനേഷൻ, 2, 1–8 (2015).
ബാരറ്റ്, എംപി, ഗിൽബെർട്ട്, ഐഎച്ച്. ട്രൈപനോസോമുകളുടെ ഉൾഭാഗത്തേക്ക് വിഷ സംയുക്തങ്ങൾ ലക്ഷ്യമിടുന്നു. പാരാസിറ്റോളജിയിലെ പുരോഗതി 63, 125–183 (2006).
നിർമാൻ, എംഎഫ്, തുടങ്ങിയവർ. മയക്കുമരുന്ന് വിതരണ വാഹനങ്ങളായി മെലാമൈൻ ഡെൻഡ്രിമറുകളുടെ ഇൻ വിട്രോ, ഇൻ വിവോ വിലയിരുത്തൽ. ഇന്റർനാഷണൽ ജേണൽ ഓഫ് ഫാർമസി, 281(1–2), 129–132(2004).
ലോകാരോഗ്യ സംഘടന. മെലാമൈൻ, സയനൂറിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ വിഷശാസ്ത്രപരമായ വശങ്ങൾ അവലോകനം ചെയ്യുന്നതിനുള്ള വിദഗ്ദ്ധ യോഗങ്ങൾ 1–4 (2008).
ഹോവെ, എകെ-സി., ക്വാൻ, ടിഎച്ച്, ലീ, പികെ-ടി. മെലാമൈൻ വിഷബാധയും വൃക്കയും. ജേണൽ ഓഫ് ദി അമേരിക്കൻ സൊസൈറ്റി ഓഫ് നെഫ്രോളജി 20(2), 245–250 (2009).
ഹൈ പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (HPLC) വഴി പാലുൽപ്പന്നങ്ങളിലെ മെലാമൈൻ തിരിച്ചറിയുന്നതിനായി ഒരു പുതിയ IMAC അഡ്‌സോർബന്റിന്റെ വികസനം. ജേണൽ ഓഫ് ഫുഡ് സിന്തസിസ് ആൻഡ് അനാലിസിസ് 100, 103931 (2021).
ചാൻസുവർൺ, വി., പാനിക്, എസ്., ഇമിം, എ. മാന്നിച്ച് ഗ്രീൻ റിയാക്ഷനെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ദ്രാവക പാലിലെ മെലാമൈനിന്റെ ലളിതമായ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് നിർണ്ണയം. സ്പെക്ട്രോകെം. ആക്റ്റ പാർട്ട് എ മോൾ. ബയോമോൾ. സ്പെക്ട്രോസ്ക്. 113, 154–158 (2013).
ഡീബ്സ്, എം., എൽ-ഹബീബ്, ആർ. എച്ച്പിഎൽസി/ഡയോഡ് അറേ ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി വഴി ശിശു ഫോർമുല, പാൽപ്പൊടി, പാൻഗാസിയസ് സാമ്പിളുകൾ എന്നിവയിൽ മെലാമൈൻ നിർണ്ണയിക്കൽ. ജേണൽ ഓഫ് എൻവയോൺമെന്റൽ അനലിറ്റിക്കൽ ടോക്സിക്കോളജി, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
സ്കിന്നർ, കെ.ജി., തോമസ്, ജെ.ഡി., ഓസ്റ്റർലോ, ജെ.ഡി. മെലാമൈൻ വിഷബാധ. ജേണൽ ഓഫ് മെഡിക്കൽ ടോക്സിക്കോളജി, 6, 50–55 (2010).
ലോകാരോഗ്യ സംഘടന (WHO), മെലാമൈൻ, സയനൂറിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ വിഷശാസ്ത്രവും ആരോഗ്യ വശങ്ങളും: ഹെൽത്ത് കാനഡയുടെ പിന്തുണയോടെ നടന്ന WHO/FAO സഹകരണ വിദഗ്ദ്ധ യോഗത്തിന്റെ റിപ്പോർട്ട്, ഒട്ടാവ, കാനഡ, 2008 ഡിസംബർ 1-4 (2009).
കോർമ, എസ്‌എ, തുടങ്ങിയവർ. നവീനമായ ഫങ്ഷണൽ സ്ട്രക്ചറൽ ലിപിഡുകളും വാണിജ്യ ശിശു ഫോർമുലയും അടങ്ങിയ ശിശു ഫോർമുല പൊടിയുടെ ലിപിഡ് ഘടനയെയും ഗുണനിലവാരത്തെയും കുറിച്ചുള്ള താരതമ്യ പഠനം. യൂറോപ്യൻ ഫുഡ് റിസർച്ച് ആൻഡ് ടെക്നോളജി 246, 2569–2586 (2020).
എൽ-വസീഫ്, എം., ഹാഷെം, എച്ച്. പാം ഓയിൽ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ശിശു ഫോർമുലയുടെ പോഷകമൂല്യം, ഗുണമേന്മ, ഷെൽഫ് ലൈഫ് എന്നിവയുടെ വർദ്ധനവ്. മിഡിൽ ഈസ്റ്റ് ജേണൽ ഓഫ് അഗ്രികൾച്ചറൽ റിസർച്ച് 6, 274–281 (2017).
യിൻ, ഡബ്ല്യു., തുടങ്ങിയവർ. മെലാമിനെതിരെ മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികളുടെ ഉത്പാദനവും അസംസ്കൃത പാൽ, ഉണങ്ങിയ പാൽ, മൃഗങ്ങളുടെ തീറ്റ എന്നിവയിൽ മെലാമൈൻ കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഒരു പരോക്ഷ മത്സര ELISA രീതിയുടെ വികസനവും. ജേണൽ ഓഫ് അഗ്രികൾച്ചറൽ ആൻഡ് ഫുഡ് കെമിസ്ട്രി 58(14), 8152–8157 (2010).