Nature.com സന്ദർശിച്ചതിന് നന്ദി. നിങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന ബ്രൗസറിന്റെ പതിപ്പിന് പരിമിതമായ CSS പിന്തുണ മാത്രമേ ഉള്ളൂ. മികച്ച ഫലങ്ങൾക്കായി, നിങ്ങളുടെ ബ്രൗസറിന്റെ പുതിയ പതിപ്പ് ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ ഇന്റർനെറ്റ് എക്സ്പ്ലോററിൽ അനുയോജ്യതാ മോഡ് ഓഫാക്കുക). അതേസമയം, തുടർച്ചയായ പിന്തുണ ഉറപ്പാക്കാൻ, സ്റ്റൈലിംഗോ ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റോ ഇല്ലാതെ ഞങ്ങൾ സൈറ്റ് കാണിക്കുന്നു.
യുനാനിൽ ഔഷധ സസ്യമായ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ കൃഷിയുടെ സുരക്ഷയ്ക്ക് കാഡ്മിയം (സിഡി) മലിനീകരണം ഒരു ഭീഷണി ഉയർത്തുന്നു. ബാഹ്യ സിഡി സമ്മർദ്ദത്തിൽ, കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്നതിന്റെ (0, 750, 2250, 3750 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ/മീ2) ഫലങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കുന്നതിനായി ഫീൽഡ് പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് (0, 0.1, 0.2 മോൾ/ലിറ്റർ) ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നത് സിഡി, ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് എന്നിവയുടെ ശേഖരണത്തെ എങ്ങനെ ബാധിക്കുന്നു എന്ന് മനസ്സിലാക്കാൻ. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വ്യവസ്ഥാപിതവും ഔഷധപരവുമായ ഘടകങ്ങൾ. സിഡി സമ്മർദ്ദത്തിൽ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ച് കുമ്മായം, ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നത് പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ Ca2+ ഉള്ളടക്കം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും Cd2+ ന്റെ വിഷാംശം കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുമെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. കുമ്മായവും ഓക്സാലിക് ആസിഡും ചേർക്കുന്നത് ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് എൻസൈമുകളുടെ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ഓസ്മോട്ടിക് റെഗുലേറ്ററുകളുടെ മെറ്റബോളിസത്തെ മാറ്റുകയും ചെയ്തു. ഏറ്റവും പ്രധാനപ്പെട്ടത് CAT പ്രവർത്തനത്തിൽ 2.77 മടങ്ങ് വർദ്ധനവാണ്. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സ്വാധീനത്തിൽ, SOD യുടെ പ്രവർത്തനം 1.78 മടങ്ങ് ആയി വർദ്ധിച്ചു. MDA ഉള്ളടക്കം 58.38% കുറഞ്ഞു. ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാര, സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകൾ, പ്രോലിൻ, ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ എന്നിവയുമായി വളരെ പ്രധാനപ്പെട്ട ബന്ധമുണ്ട്. നാരങ്ങയ്ക്കും ഓക്സാലിക് ആസിഡിനും പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ കാൽസ്യം അയോണിന്റെ (Ca2+) അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കാനും, സിഡി ഉള്ളടക്കം കുറയ്ക്കാനും, പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ സമ്മർദ്ദ പ്രതിരോധം മെച്ചപ്പെടുത്താനും, മൊത്തം സാപ്പോണിനുകളുടെയും ഫ്ലേവനോയ്ഡുകളുടെയും ഉത്പാദനം വർദ്ധിപ്പിക്കാനും കഴിയും. സിഡി ഉള്ളടക്കം ഏറ്റവും താഴ്ന്നതാണ്, നിയന്ത്രണത്തേക്കാൾ 68.57% കുറവാണ്, കൂടാതെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് മൂല്യവുമായി (Cd≤0.5 mg kg-1, GB/T 19086-2008) യോജിക്കുന്നു. SPN ന്റെ അനുപാതം 7.73% ആയിരുന്നു, എല്ലാ ചികിത്സകളിലും ഏറ്റവും ഉയർന്ന നിലയിലെത്തി, ഫ്ലേവനോയിഡ് ഉള്ളടക്കം 21.74% ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു, സ്റ്റാൻഡേർഡ് മെഡിക്കൽ മൂല്യങ്ങളിലും ഒപ്റ്റിമൽ വിളവിലും എത്തി.
കൃഷി ചെയ്ത മണ്ണിലെ ഒരു സാധാരണ മലിനീകരണ വസ്തു ആണ് കാഡ്മിയം (Cd). എളുപ്പത്തിൽ കുടിയേറുകയും ജൈവശാസ്ത്രപരമായി വിഷാംശം ഉണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. കാഡ്മിയം വിഷാംശം ഉപയോഗിക്കുന്ന സസ്യങ്ങളുടെ ഗുണനിലവാരത്തെയും ഉൽപാദനക്ഷമതയെയും ബാധിക്കുമെന്ന് എൽ-ഷാഫെയ് തുടങ്ങിയവർ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. തെക്കുപടിഞ്ഞാറൻ ചൈനയിലെ കൃഷി ചെയ്ത മണ്ണിൽ കാഡ്മിയത്തിന്റെ അമിതമായ അളവ് സമീപ വർഷങ്ങളിൽ ഗുരുതരമായി മാറിയിരിക്കുന്നു. ചൈനയുടെ ജൈവവൈവിധ്യ രാജ്യമാണ് യുനാൻ പ്രവിശ്യ, ഔഷധ സസ്യ ഇനങ്ങൾ രാജ്യത്ത് ഒന്നാം സ്ഥാനത്താണ്. എന്നിരുന്നാലും, യുനാൻ പ്രവിശ്യ ധാതു വിഭവങ്ങളാൽ സമ്പന്നമാണ്, ഖനന പ്രക്രിയ അനിവാര്യമായും മണ്ണിൽ ഘന ലോഹ മലിനീകരണത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു, ഇത് പ്രാദേശിക ഔഷധ സസ്യങ്ങളുടെ ഉൽപാദനത്തെ ബാധിക്കുന്നു.
പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് (ബർകിൽ) ചെൻ3) അരാലിയേസി കുടുംബത്തിലെ പനാക്സ് ജനുസ്സിൽ പെടുന്ന വളരെ വിലപ്പെട്ട ഒരു വറ്റാത്ത ഔഷധ സസ്യമാണ്. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് രക്തചംക്രമണം മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും രക്ത സ്തംഭനം ഇല്ലാതാക്കുകയും വേദന ഒഴിവാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. പ്രധാന ഉൽപാദന മേഖല യുനാൻ പ്രവിശ്യയിലെ വെൻഷാൻ പ്രിഫെക്ചറാണ്5. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് ജിൻസെങ് വളരുന്ന പ്രാദേശിക പ്രദേശങ്ങളിലെ മണ്ണിന്റെ 75% ത്തിലധികവും കാഡ്മിയത്താൽ മലിനീകരിക്കപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, വ്യത്യസ്ത പ്രദേശങ്ങളിൽ അളവ് 81% മുതൽ 100% വരെ വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു6. സിഡിയുടെ വിഷാംശം പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ ഔഷധ ഘടകങ്ങളുടെ ഉത്പാദനത്തെയും ഗണ്യമായി കുറയ്ക്കുന്നു, പ്രത്യേകിച്ച് സാപ്പോണിനുകളും ഫ്ലേവനോയിഡുകളും. ട്രൈറ്റെർപെനോയിഡുകളോ സ്പൈറോസ്റ്റേനുകളോ ആയ അഗ്ലൈക്കോണുകൾ ആയ ഒരു തരം ഗ്ലൈക്കോസിഡിക് സംയുക്തമാണ് സാപ്പോണിനുകൾ. പല പരമ്പരാഗത ചൈനീസ് മരുന്നുകളുടെയും പ്രധാന സജീവ ഘടകങ്ങളാണ് അവ, സാപ്പോണിനുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ചില സാപ്പോണിനുകൾക്ക് ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ പ്രവർത്തനമോ ആന്റിപൈറിറ്റിക്, സെഡേറ്റീവ്, ആന്റികാൻസർ ഇഫക്റ്റുകൾ പോലുള്ള വിലയേറിയ ജൈവ പ്രവർത്തനങ്ങളോ ഉണ്ട്7. മൂന്ന് കേന്ദ്ര കാർബൺ ആറ്റങ്ങളിലൂടെ ഫിനോളിക് ഹൈഡ്രോക്‌സിൽ ഗ്രൂപ്പുകളുള്ള രണ്ട് ബെൻസീൻ വളയങ്ങൾ ബന്ധിപ്പിക്കുന്ന സംയുക്തങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയെയാണ് ഫ്ലേവനോയിഡുകൾ സാധാരണയായി സൂചിപ്പിക്കുന്നത്. പ്രധാന കാമ്പ് 2-ഫീനൈൽക്രോമനോൺ ആണ് 8. സസ്യങ്ങളിലെ ഓക്സിജൻ ഫ്രീ റാഡിക്കലുകളെ ഫലപ്രദമായി നീക്കം ചെയ്യാൻ കഴിയുന്ന ശക്തമായ ആന്റിഓക്‌സിഡന്റാണിത്. ഇത് കോശജ്വലന ജൈവ എൻസൈമുകളുടെ നുഴഞ്ഞുകയറ്റത്തെ തടയുകയും, മുറിവ് ഉണക്കലും വേദന പരിഹാരവും പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുകയും, കൊളസ്ട്രോൾ അളവ് കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്തേക്കാം. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ പ്രധാന സജീവ ഘടകങ്ങളിൽ ഒന്നാണിത്. പനാക്സ് ജിൻസെങ് ഉൽപ്പാദന മേഖലകളിലെ മണ്ണിലെ കാഡ്മിയം മലിനീകരണ പ്രശ്നം പരിഹരിക്കേണ്ടതും അതിന്റെ അവശ്യ ഔഷധ ചേരുവകളുടെ ഉത്പാദനം ഉറപ്പാക്കേണ്ടതും അടിയന്തിരമായി ആവശ്യമാണ്.
കാഡ്മിയം മലിനീകരണത്തിൽ നിന്ന് സ്ഥിരമായ മണ്ണ് ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതിന് വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന പാസിവേറ്ററുകളിൽ ഒന്നാണ് കുമ്മായം10. pH മൂല്യം വർദ്ധിപ്പിച്ച് മണ്ണിലെ കാറ്റേഷൻ എക്സ്ചേഞ്ച് ശേഷി (CEC), മണ്ണിന്റെ ഉപ്പ് സാച്ചുറേഷൻ (BS), മണ്ണിന്റെ റെഡോക്സ് പൊട്ടൻഷ്യൽ (Eh)3, 11 എന്നിവ മാറ്റുന്നതിലൂടെ മണ്ണിലെ Cd യുടെ ജൈവ ലഭ്യത കുറയ്ക്കുന്നതിലൂടെ മണ്ണിലെ Cd യുടെ ആഗിരണം, നിക്ഷേപം എന്നിവയെ ഇത് ബാധിക്കുന്നു. കൂടാതെ, , കുമ്മായം വലിയ അളവിൽ Ca2+ നൽകുന്നു, Cd2+ മായി അയോണിക് വൈരുദ്ധ്യം ഉണ്ടാക്കുന്നു, വേരുകളിൽ ആഗിരണം സൈറ്റുകൾക്കായി മത്സരിക്കുന്നു, മണ്ണിലേക്ക് Cd യുടെ ഗതാഗതം തടയുന്നു, കൂടാതെ കുറഞ്ഞ ജൈവ വിഷാംശം ഉണ്ട്. Cd സമ്മർദ്ദത്തിൽ 50 mmol L-1 Ca ചേർത്തപ്പോൾ, എള്ള് ഇലകളിലെ Cd ഗതാഗതം തടയപ്പെടുകയും Cd ശേഖരണം 80% കുറയുകയും ചെയ്തു. നെല്ലിലും (Oryza sativa L.) മറ്റ് വിളകളിലും സമാനമായ നിരവധി പഠനങ്ങൾ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്12,13.
സമീപ വർഷങ്ങളിൽ ഘനലോഹങ്ങളുടെ ശേഖരണം നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനായി വിളകളിൽ ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നത് ഘനലോഹങ്ങളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു പുതിയ രീതിയാണ്. ഇതിന്റെ തത്വം പ്രധാനമായും സസ്യകോശങ്ങളിലെ ചേലേഷൻ പ്രതിപ്രവർത്തനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, ഇത് കോശഭിത്തിയിൽ ഘനലോഹങ്ങൾ നിക്ഷേപിക്കപ്പെടുന്നതിനും സസ്യങ്ങൾ ഘനലോഹങ്ങൾ ആഗിരണം ചെയ്യുന്നത് തടയുന്നതിനും കാരണമാകുന്നു14,15. ഒരു സ്ഥിരതയുള്ള ഡയാസിഡ് ചേലേറ്റിംഗ് ഏജന്റ് എന്ന നിലയിൽ, ഓക്സാലിക് ആസിഡിന് സസ്യങ്ങളിലെ ഘനലോഹ അയോണുകളെ നേരിട്ട് ചേലേറ്റ് ചെയ്യാൻ കഴിയും, അതുവഴി വിഷാംശം കുറയ്ക്കുന്നു. സോയാബീനിലെ ഓക്സാലിക് ആസിഡിന് സിഡി2+ ചേലേറ്റ് ചെയ്യാനും മുകളിലെ ട്രൈക്കോം കോശങ്ങളിലൂടെ സിഡി അടങ്ങിയ പരലുകൾ പുറത്തുവിടാനും ശരീരത്തിലെ സിഡി2+ അളവ് കുറയ്ക്കാനും കഴിയുമെന്ന് ഗവേഷണങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്16. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന് മണ്ണിന്റെ പിഎച്ച് നിയന്ത്രിക്കാനും സൂപ്പർഓക്സൈഡ് ഡിസ്മുട്ടേസ് (എസ്ഒഡി), പെറോക്സിഡേസ് (പിഒഡി), കാറ്റലേസ് (സിഎടി) എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കാനും ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാര, ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ, സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകൾ, പ്രോലൈൻ എന്നിവയുടെ നുഴഞ്ഞുകയറ്റം നിയന്ത്രിക്കാനും കഴിയും. മെറ്റബോളിക് റെഗുലേറ്ററുകൾ17,18. സസ്യത്തിലെ ആസിഡും അധിക Ca2+ ഉം ന്യൂക്ലിയേറ്റിംഗ് പ്രോട്ടീനുകളുടെ പ്രവർത്തനത്തിൽ ഒരു കാൽസ്യം ഓക്സലേറ്റ് അവശിഷ്ടമായി മാറുന്നു. സസ്യങ്ങളിലെ Ca2+ സാന്ദ്രത നിയന്ത്രിക്കുന്നത് സസ്യങ്ങളിൽ അലിഞ്ഞുചേർന്ന ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും Ca2+ ന്റെയും നിയന്ത്രണം ഫലപ്രദമായി കൈവരിക്കാനും ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും Ca2+ 19,20 ന്റെയും അമിതമായ ശേഖരണം ഒഴിവാക്കാനും സഹായിക്കും.
നന്നാക്കൽ ഫലത്തെ സ്വാധീനിക്കുന്ന പ്രധാന ഘടകങ്ങളിൽ ഒന്നാണ് കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ്. കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് 750 മുതൽ 6000 കിലോഗ്രാം/m2 വരെയാണെന്ന് കണ്ടെത്തി. 5.0~5.5 pH ഉള്ള അമ്ലത്വമുള്ള മണ്ണിൽ, 3000~6000 കിലോഗ്രാം/h/m2 എന്ന അളവിൽ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം 750 kg/h/m2 എന്ന അളവിൽ ഉള്ളതിനേക്കാൾ വളരെ കൂടുതലാണ്. എന്നിരുന്നാലും, കുമ്മായം അമിതമായി പ്രയോഗിക്കുന്നത് മണ്ണിൽ ചില പ്രതികൂല ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കും, അതായത് മണ്ണിന്റെ pH-ൽ കാര്യമായ മാറ്റങ്ങൾ, മണ്ണിന്റെ സങ്കോചം22. അതിനാൽ, CaO ചികിത്സാ അളവ് 0, 750, 2250, 3750 kg hm-2 എന്നിങ്ങനെ ഞങ്ങൾ നിർവചിച്ചു. അറബിഡോപ്സിസ് താലിയാനയിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് പ്രയോഗിച്ചപ്പോൾ, 10 mmol L-1 സാന്ദ്രതയിൽ Ca2+ ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞതായി കണ്ടെത്തി, കൂടാതെ Ca2+ സിഗ്നലിംഗിനെ ബാധിക്കുന്ന CRT ജീൻ കുടുംബം ശക്തമായി പ്രതികരിച്ചു20. മുൻകാല പഠനങ്ങളുടെ ശേഖരണം ഈ പരിശോധനയുടെ സാന്ദ്രത നിർണ്ണയിക്കാനും Ca2+, Cd2+23,24,25 എന്നിവയിൽ ബാഹ്യ സപ്ലിമെന്റുകളുടെ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ ഫലത്തെക്കുറിച്ച് കൂടുതൽ പഠിക്കാനും ഞങ്ങളെ അനുവദിച്ചു. അതിനാൽ, സിഡി-മലിനമായ മണ്ണിൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ സിഡി ഉള്ളടക്കത്തിലും സമ്മർദ്ദ സഹിഷ്ണുതയിലും ബാഹ്യ കുമ്മായത്തിന്റെയും ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ലീഫ് സ്പ്രേയുടെയും നിയന്ത്രണ സംവിധാനം പര്യവേക്ഷണം ചെയ്യുക, ഔഷധ ഗുണനിലവാരവും ഫലപ്രാപ്തിയും മികച്ച രീതിയിൽ ഉറപ്പാക്കാനുള്ള വഴികൾ കൂടുതൽ പര്യവേക്ഷണം ചെയ്യുക എന്നിവയാണ് ഈ പഠനം ലക്ഷ്യമിടുന്നത്. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് ഉത്പാദനം. കാഡ്മിയം-മലിനമായ മണ്ണിൽ സസ്യസസ്യ കൃഷിയുടെ വ്യാപ്തി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ മാർക്കറ്റിന് ആവശ്യമായ ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ളതും സുസ്ഥിരവുമായ ഉൽപാദനം കൈവരിക്കുന്നതിനും അദ്ദേഹം വിലപ്പെട്ട മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശം നൽകുന്നു.
പ്രാദേശിക ജിൻസെങ് ഇനമായ വെൻഷാൻ പനാക്സ് നോട്ടോഗിൻസെങ്ങിനെ വസ്തുവായി ഉപയോഗിച്ച്, യുനാൻ പ്രവിശ്യയിലെ വെൻഷാൻ പ്രിഫെക്ചറിലെ ക്യുബെയ് കൗണ്ടിയിലെ ലാനിഷായിൽ (24°11′N, 104°3′E, ഉയരം 1446 മീ) ഒരു ഫീൽഡ് പരീക്ഷണം നടത്തി. ശരാശരി വാർഷിക താപനില 17°C ഉം ശരാശരി വാർഷിക മഴ 1250 മില്ലിമീറ്ററുമാണ്. പഠിച്ച മണ്ണിന്റെ പശ്ചാത്തല മൂല്യങ്ങൾ TN 0.57 g kg-1, TP 1.64 g kg-1, TC 16.31 g kg-1, OM 31.86 g kg-1, ആൽക്കലി ഹൈഡ്രോലൈസ്ഡ് N 88.82 mg kg-1, ഫോസ്ഫറസ് രഹിതം. 18.55 mg kg-1, സ്വതന്ത്ര പൊട്ടാസ്യം 100.37 mg kg-1, ആകെ കാഡ്മിയം 0.3 mg kg-1, pH 5.4 എന്നിവയായിരുന്നു.
2017 ഡിസംബർ 10-ന്, 6 mg/kg Cd2+ (CdCl2·2.5H2O), കുമ്മായം സംസ്കരണം (0, 750, 2250, 3750 kg/h/m2) എന്നിവ കലർത്തി ഓരോ പ്ലോട്ടിന്റെയും 0~10 സെന്റീമീറ്റർ പാളിയിൽ മണ്ണിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ പുരട്ടി. ഓരോ ചികിത്സയും 3 തവണ ആവർത്തിച്ചു. ടെസ്റ്റ് പ്ലോട്ടുകൾ ക്രമരഹിതമായി സ്ഥിതിചെയ്യുന്നു, ഓരോ പ്ലോട്ടും 3 മീ 2 വിസ്തീർണ്ണം ഉൾക്കൊള്ളുന്നു. 15 ദിവസത്തെ കൃഷിക്ക് ശേഷം ഒരു വർഷം പ്രായമുള്ള പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് തൈകൾ പറിച്ചുനടുന്നു. ഒരു സൺഷെയ്ഡ് നെറ്റ് ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, സൺഷെയ്ഡ് നെറ്റ് ഉള്ളിലെ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ പ്രകാശ തീവ്രത സാധാരണ പ്രകൃതിദത്ത പ്രകാശ തീവ്രതയുടെ ഏകദേശം 18% ആണ്. പ്രാദേശിക പരമ്പരാഗത കൃഷി രീതികൾ അനുസരിച്ചാണ് കൃഷി നടത്തുന്നത്. 2019-ൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ പാകമാകുന്ന ഘട്ടത്തിന് മുമ്പ്, സോഡിയം ഓക്സലേറ്റിന്റെ രൂപത്തിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുക. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രത യഥാക്രമം 0, 0.1, 0.2 mol L-1 ആയിരുന്നു, ലിറ്റർ ലീച്ച് ലായനിയുടെ ശരാശരി pH അനുകരിക്കുന്നതിന് pH 5.16 ആയി ക്രമീകരിക്കാൻ NaOH ഉപയോഗിച്ചു. ഇലകളുടെ മുകളിലും താഴെയുമുള്ള പ്രതലങ്ങളിൽ ആഴ്ചയിൽ ഒരിക്കൽ രാവിലെ 8:00 മണിക്ക് തളിക്കുക. അഞ്ചാമത്തെ ആഴ്ചയിൽ 4 തവണ തളിച്ചതിന് ശേഷം, 3 വയസ്സ് പ്രായമുള്ള പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് സസ്യങ്ങൾ വിളവെടുത്തു.
2019 നവംബറിൽ, മൂന്ന് വർഷം പ്രായമുള്ള പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് സസ്യങ്ങൾ വയലിൽ നിന്ന് ശേഖരിച്ച് ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചു. ഫിസിയോളജിക്കൽ മെറ്റബോളിസത്തിനും എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തിനും അളക്കേണ്ട മൂന്ന് വർഷം പ്രായമുള്ള പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് സസ്യങ്ങളുടെ ചില സാമ്പിളുകൾ മരവിപ്പിക്കുന്നതിനായി ട്യൂബുകളിൽ സ്ഥാപിച്ചു. ദ്രാവക നൈട്രജൻ ഉപയോഗിച്ച് വേഗത്തിൽ ഫ്രീസ് ചെയ്ത് -80°C-ൽ റഫ്രിജറേറ്ററിലേക്ക് മാറ്റി. പക്വത ഘട്ടത്തിൽ സിഡിയും സജീവ ചേരുവകളുടെ ഉള്ളടക്കവും അളക്കേണ്ട ചില വേര് സാമ്പിളുകൾ ടാപ്പ് വെള്ളത്തിൽ കഴുകി, 105°C-ൽ 30 മിനിറ്റ്, സ്ഥിരമായ ഭാരത്തിൽ 75°C-ൽ, സംഭരണത്തിനായി ഒരു മോർട്ടറിൽ പൊടിച്ചു.
0.2 ഗ്രാം ഉണങ്ങിയ സസ്യ സാമ്പിൾ അളന്ന്, ഒരു എർലെൻമെയർ ഫ്ലാസ്കിൽ വയ്ക്കുക, 8 മില്ലി HNO3 ഉം 2 മില്ലി HClO4 ഉം ചേർത്ത് രാത്രി മുഴുവൻ മൂടുക. അടുത്ത ദിവസം, വെളുത്ത പുക പ്രത്യക്ഷപ്പെടുകയും ദഹനരസങ്ങൾ വ്യക്തമാകുകയും ചെയ്യുന്നതുവരെ ഇലക്ട്രോതെർമൽ ദഹനത്തിനായി ഒരു എർലെൻമെയർ ഫ്ലാസ്കിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്ന ഒരു വളഞ്ഞ ഫണൽ ഉപയോഗിക്കുക. മുറിയിലെ താപനിലയിലേക്ക് തണുപ്പിച്ച ശേഷം, മിശ്രിതം 10 മില്ലി വോള്യൂമെട്രിക് ഫ്ലാസ്കിലേക്ക് മാറ്റി. ഒരു ആറ്റോമിക് അബ്സോർപ്ഷൻ സ്പെക്ട്രോമീറ്റർ (തെർമോ ഐസിഇ™ 3300 എഎഎസ്, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ചാണ് സിഡി ഉള്ളടക്കം നിർണ്ണയിച്ചത്. (ജിബി/ടി 23739-2009).
0.2 ഗ്രാം ഉണങ്ങിയ സസ്യ സാമ്പിൾ തൂക്കി, 50 മില്ലി പ്ലാസ്റ്റിക് കുപ്പിയിൽ വയ്ക്കുക, 10 മില്ലിയിൽ 1 മോൾ L-1 HCL ചേർത്ത്, മൂടി 15 മണിക്കൂർ നന്നായി കുലുക്കി ഫിൽട്ടർ ചെയ്യുക. ഒരു പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിച്ച്, ആവശ്യമായ അളവിൽ ഫിൽട്രേറ്റ് പൈപ്പ് ചെയ്ത്, അതനുസരിച്ച് നേർപ്പിച്ച്, SrCl2 ലായനി ചേർത്ത് Sr2+ സാന്ദ്രത 1 ഗ്രാം L-1 ആക്കി മാറ്റുക. ഒരു ആറ്റോമിക് അബ്സോർപ്ഷൻ സ്പെക്ട്രോമീറ്റർ (തെർമോ ICE™ 3300 AAS, USA) ഉപയോഗിച്ചാണ് Ca ഉള്ളടക്കം അളന്നത്.
മാലോൺഡിയാൽഡിഹൈഡ് (എംഡിഎ), സൂപ്പർഓക്സൈഡ് ഡിസ്മുട്ടേസ് (എസ്ഒഡി), പെറോക്സിഡേസ് (പിഒഡി), കാറ്റലേസ് (സിഎടി) റഫറൻസ് കിറ്റ് രീതി (ഡിഎൻഎം-9602, ബീജിംഗ് പ്രോങ് ന്യൂ ടെക്നോളജി കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്, ഉൽപ്പന്ന രജിസ്ട്രേഷൻ), അനുബന്ധ അളവെടുപ്പ് കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നു. നമ്പർ: ബീജിംഗ് ഫാർമക്കോപ്പിയ (കൃത്യം) 2013 നമ്പർ 2400147).
ഏകദേശം 0.05 ഗ്രാം പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് സാമ്പിൾ തൂക്കി ട്യൂബിന്റെ വശങ്ങളിൽ ആന്ത്രോൺ-സൾഫ്യൂറിക് ആസിഡ് റിയാജന്റ് ചേർക്കുക. ദ്രാവകം നന്നായി കലർത്താൻ ട്യൂബ് 2-3 സെക്കൻഡ് കുലുക്കുക. 15 മിനിറ്റ് നിറം ലഭിക്കാൻ ട്യൂബ് ഒരു ട്യൂബ് റാക്കിൽ വയ്ക്കുക. 620 nm തരംഗദൈർഘ്യത്തിൽ അൾട്രാവയലറ്റ്-ദൃശ്യ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി (UV-5800, ഷാങ്ഹായ് യുവാൻസി ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ചാണ് ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ് നിർണ്ണയിച്ചത്.
പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ പുതിയ സാമ്പിളിന്റെ 0.5 ഗ്രാം തൂക്കി, 5 മില്ലി വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ ഒരു ഹോമോജെനേറ്റാക്കി പൊടിക്കുക, തുടർന്ന് 10,000 ഗ്രാം സെൻട്രിഫ്യൂജ് ഉപയോഗിച്ച് 10 മിനിറ്റ് നേരം വയ്ക്കുക. സൂപ്പർനേറ്റന്റ് ഒരു നിശ്ചിത അളവിൽ നേർപ്പിച്ചു. കൂമാസി ബ്രില്യന്റ് ബ്ലൂ രീതി ഉപയോഗിച്ചു. ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ ഉള്ളടക്കം 595 nm തരംഗദൈർഘ്യത്തിൽ അൾട്രാവയലറ്റ്-ദൃശ്യ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി (UV-5800, ഷാങ്ഹായ് യുവാൻസി ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ച് അളക്കുകയും ബോവിൻ സെറം ആൽബുമിന്റെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് വക്രത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി കണക്കാക്കുകയും ചെയ്തു.
പുതിയ സാമ്പിൾ 0.5 ഗ്രാം തൂക്കി, 5 മില്ലി 10% അസറ്റിക് ആസിഡ് ചേർത്ത്, ഒരു ഹോമോജെനേറ്റ് അവസ്ഥയിലേക്ക് പൊടിച്ച്, ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത് സ്ഥിരമായ വോള്യത്തിലേക്ക് നേർപ്പിക്കുക. നിൻഹൈഡ്രിൻ ലായനി ഉപയോഗിച്ചാണ് കളർ ഡെവലപ്‌മെന്റ് രീതി ഉപയോഗിച്ചത്. 570 nm-ൽ UV–ദൃശ്യ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി (UV-5800, ഷാങ്ഹായ് യുവാൻസി ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ച് സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുകയും ല്യൂസിൻ സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവ്28 അടിസ്ഥാനമാക്കി കണക്കാക്കുകയും ചെയ്തു.
ഒരു പുതിയ സാമ്പിളിന്റെ 0.5 ഗ്രാം തൂക്കി, 3% സൾഫോസാലിസിലിക് ആസിഡ് ലായനിയിൽ 5 മില്ലി ചേർത്ത്, ഒരു വാട്ടർ ബാത്തിൽ ചൂടാക്കി 10 മിനിറ്റ് കുലുക്കുക. തണുപ്പിച്ച ശേഷം, ലായനി ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത് സ്ഥിരമായ വോള്യത്തിലേക്ക് കൊണ്ടുവന്നു. ആസിഡ് നിൻഹൈഡ്രിൻ ഉപയോഗിച്ചുള്ള കളറിമെട്രിക് രീതി ഉപയോഗിച്ചു. 520 nm തരംഗദൈർഘ്യത്തിൽ അൾട്രാവയലറ്റ്-ദൃശ്യ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി (UV-5800, ഷാങ്ഹായ് യുവാൻസി ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ച് പ്രോലിൻ ഉള്ളടക്കം നിർണ്ണയിക്കുകയും പ്രോലൈൻ സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവ്29 അടിസ്ഥാനമാക്കി കണക്കാക്കുകയും ചെയ്തു.
പീപ്പിൾസ് റിപ്പബ്ലിക് ഓഫ് ചൈനയുടെ ഫാർമക്കോപ്പിയ (2015 പതിപ്പ്) പരാമർശിച്ച് ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി ഉപയോഗിച്ചാണ് സാപ്പോണിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിച്ചത്. ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ദ്രാവക ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അടിസ്ഥാന തത്വം ഉയർന്ന മർദ്ദമുള്ള ദ്രാവകത്തെ മൊബൈൽ ഘട്ടമായി ഉപയോഗിക്കുകയും ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള കോളം ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ അൾട്രാഫൈൻ കണികാ വേർതിരിക്കൽ സാങ്കേതികവിദ്യ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിൽ പ്രയോഗിക്കുകയും ചെയ്യുക എന്നതാണ്. പ്രവർത്തന സാങ്കേതികത ഇപ്രകാരമാണ്:
HPLC കണ്ടീഷനുകളും സിസ്റ്റം അനുയോജ്യതാ പരിശോധനയും (പട്ടിക 1): ഫില്ലറായി ഒക്ടാഡെസൈൽസിലെയ്ൻ ബന്ധിത സിലിക്ക ജെൽ, മൊബൈൽ ഘട്ടം A ആയി അസെറ്റോണിട്രൈൽ, മൊബൈൽ ഘട്ടം B ആയി വെള്ളം എന്നിവ ഉപയോഗിക്കുക. താഴെയുള്ള പട്ടികയിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ ഗ്രേഡിയന്റ് എല്യൂഷൻ നടത്തുക. കണ്ടെത്തൽ തരംഗദൈർഘ്യം 203 nm ആണ്. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ മൊത്തം സാപ്പോണിനുകളുടെ R1 പീക്ക് അനുസരിച്ച്, സൈദ്ധാന്തിക പ്ലേറ്റുകളുടെ എണ്ണം കുറഞ്ഞത് 4000 ആയിരിക്കണം.
സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനി തയ്യാറാക്കൽ: ജിൻസെനോസൈഡ് Rg1, ജിൻസെനോസൈഡ് Rb1, നോട്ടോജിൻസെനോസൈഡ് R1 എന്നിവ കൃത്യമായി തൂക്കി മെഥനോൾ ചേർത്ത് 1 മില്ലി ലായനിയിൽ 0.4 mg ജിൻസെനോസൈഡ് Rg1, 0.4 mg ജിൻസെനോസൈഡ് Rb1, 0.1 mg നോട്ടോജിൻസെനോസൈഡ് R1 എന്നിവ അടങ്ങിയ മിശ്രിതം തയ്യാറാക്കുക.
പരീക്ഷണ ലായനി തയ്യാറാക്കൽ: 0.6 ഗ്രാം പനാക്സ് ജിൻസെങ് പൊടി എടുത്ത് 50 മില്ലി മെഥനോൾ ചേർക്കുക. മിശ്രിത ലായനി തൂക്കി (W1) രാത്രി മുഴുവൻ വയ്ക്കണം. മിശ്രിത ലായനി 80°C താപനിലയിൽ ഒരു വാട്ടർ ബാത്തിൽ 2 മണിക്കൂർ സൌമ്യമായി തിളപ്പിക്കണം. തണുത്തതിനുശേഷം, മിശ്രിത ലായനി തൂക്കി തയ്യാറാക്കിയ മെഥനോൾ ആദ്യത്തെ പിണ്ഡമായ W1 ലേക്ക് ചേർക്കുക. പിന്നീട് നന്നായി കുലുക്കി ഫിൽട്ടർ ചെയ്യുക. ഫിൽട്രേറ്റ് വിശകലനത്തിനായി അവശേഷിക്കുന്നു.
സാപ്പോണിൻ 24 ന്റെ ഉള്ളടക്കം നിർണ്ണയിക്കാൻ 10 μL സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനിയും 10 μL ഫിൽട്രേറ്റും കൃത്യമായി ശേഖരിച്ച് ഒരു ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിലേക്ക് (തെർമോ HPLC-ultimate 3000, സെയ്മൂർ ഫിഷർ ടെക്നോളജി കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്) കുത്തിവയ്ക്കുക.
സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവ്: Rg1, Rb1, R1 എന്നിവയുടെ മിക്സഡ് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനിയുടെ അളവ്. ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി അവസ്ഥകൾ മുകളിൽ പറഞ്ഞതിന് സമാനമാണ്. y-അക്ഷത്തിൽ അളന്ന പീക്ക് ഏരിയയും x-അക്ഷത്തിൽ സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനിയിലെ സാപ്പോണിന്റെ സാന്ദ്രതയും പ്ലോട്ട് ചെയ്തുകൊണ്ട് സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവ് കണക്കാക്കുക. സാമ്പിളിന്റെ അളന്ന പീക്ക് ഏരിയ സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവിൽ മാറ്റിസ്ഥാപിച്ചുകൊണ്ട് സാപ്പോണിന്റെ സാന്ദ്രത കണക്കാക്കാം.
0.1 ഗ്രാം പി. നോട്ടോജെൻസിങ്സ് സാമ്പിൾ തൂക്കി 50 മില്ലി 70% CH3OH ലായനി ചേർക്കുക. 2 മണിക്കൂർ അൾട്രാസോണിക് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ നടത്തി, തുടർന്ന് 4000 rpm-ൽ 10 മിനിറ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ നടത്തി. 1 മില്ലി സൂപ്പർനേറ്റന്റ് എടുത്ത് 12 തവണ നേർപ്പിക്കുക. 249 nm തരംഗദൈർഘ്യത്തിൽ അൾട്രാവയലറ്റ്-ദൃശ്യമായ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി (UV-5800, ഷാങ്ഹായ് യുവാൻസി ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് കമ്പനി, ലിമിറ്റഡ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ചാണ് ഫ്ലേവനോയിഡിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിച്ചത്. ക്വെർസെറ്റിൻ സാധാരണ ഉപയോഗിക്കുന്ന പദാർത്ഥങ്ങളിൽ ഒന്നാണ്8.
എക്സൽ 2010 സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഉപയോഗിച്ചാണ് ഡാറ്റ ക്രമീകരിച്ചത്. ഡാറ്റയിലെ വ്യതിയാന വിശകലനം നടത്താൻ SPSS 20 സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഉപയോഗിച്ചു. ഒറിജിൻ പ്രോ 9.1 ഉപയോഗിച്ചാണ് ചിത്രങ്ങൾ വരച്ചത്. കണക്കാക്കിയ സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ മൂല്യങ്ങളിൽ ശരാശരി ± SD ഉൾപ്പെടുന്നു. സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ പ്രാധാന്യത്തിന്റെ പ്രസ്താവനകൾ P < 0.05 അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ്.
ഇലകളിൽ തളിക്കുന്ന ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ അതേ സാന്ദ്രതയിൽ, പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരുകളിലെ Ca യുടെ അളവ് കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് വർദ്ധിച്ചതിനാൽ ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു (പട്ടിക 2). കുമ്മായത്തിന്റെ അഭാവവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെ 3750 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ/മീ2 കുമ്മായം ചേർക്കുമ്പോൾ Ca യുടെ അളവ് 212% വർദ്ധിച്ചു. അതേ അളവിൽ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേയുടെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിച്ചതിനാൽ Ca യുടെ അളവ് അല്പം വർദ്ധിച്ചു.
വേരുകളിലെ സിഡി ഉള്ളടക്കം 0.22 മുതൽ 0.70 മില്ലിഗ്രാം / കിലോഗ്രാം വരെയാണ്. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ അതേ സ്പ്രേ സാന്ദ്രതയിൽ, ചേർക്കുന്ന കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച്, 2250 കിലോഗ്രാം / മണിക്കൂർ എന്ന സിഡി ഉള്ളടക്കം ഗണ്യമായി കുറയുന്നു. നിയന്ത്രണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, 2250 കിലോഗ്രാം എച്ച്എം -2 കുമ്മായവും 0.1 മോൾ എൽ -1 ഓക്സാലിക് ആസിഡും തളിച്ചതിന് ശേഷം വേരുകളിലെ സിഡി ഉള്ളടക്കം 68.57% കുറഞ്ഞു. കുമ്മായമില്ലാത്തതും 750 കിലോഗ്രാം / മണിക്കൂർ കുമ്മായവും പ്രയോഗിച്ചപ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേയുടെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരുകളിലെ സിഡി ഉള്ളടക്കം ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു. 2250 കിലോഗ്രാം / ചതുരശ്ര മീറ്റർ കുമ്മായവും 3750 കിലോഗ്രാം / ചതുരശ്ര മീറ്റർ കുമ്മായവും പ്രയോഗിച്ചപ്പോൾ, വേരുകളിലെ സിഡി ഉള്ളടക്കം ആദ്യം കുറയുകയും പിന്നീട് ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് വർദ്ധിക്കുകയും ചെയ്തു. കൂടാതെ, പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ Ca ഉള്ളടക്കത്തിൽ കുമ്മായം ഗണ്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തിയതായി ദ്വിവേരിയേറ്റ് വിശകലനം കാണിച്ചു (F = 82.84**), പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ സിഡി ഉള്ളടക്കത്തിൽ കുമ്മായം ഗണ്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തി (F = 74.99**), ഓക്സാലിക് ആസിഡ്. ആസിഡ് (F=7.72*).
കുമ്മായത്തിന്റെ അളവും സ്പ്രേ ചെയ്ത ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രതയും വർദ്ധിച്ചതോടെ, MDA അളവ് ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു. കുമ്മായം ചേർക്കാതെയും 3750 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായം ചേർത്തും പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരുകളിൽ MDA അളവിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമൊന്നും ഉണ്ടായില്ല. 750 കിലോഗ്രാം/h/m2, 2250 കിലോഗ്രാം/h/m2 എന്നീ പ്രയോഗ നിരക്കുകളിൽ, 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയുടെ കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് യഥാക്രമം 58.38% ഉം 40.21% ഉം കുറഞ്ഞു, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയില്ലാത്തതിനെ അപേക്ഷിച്ച്. 750 കിലോഗ്രാം hm-2 കുമ്മായവും 0.2 mol l-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡും തളിക്കുമ്പോൾ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ MDA അളവ് (7.57 nmol g-1) നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു (ചിത്രം 1).
കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദത്തിൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ മാലോൺഡിയാൾഡിഹൈഡിന്റെ ഉള്ളടക്കത്തിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം. കുറിപ്പ്: ചിത്രത്തിലെ ഇതിഹാസം സ്പ്രേയിലെ ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രതയെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു (mol L-1), വ്യത്യസ്ത ചെറിയ അക്ഷരങ്ങൾ ഒരേ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്നതിന്റെ ചികിത്സകൾ തമ്മിലുള്ള കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. നമ്പർ (P < 0.05). താഴെയും അങ്ങനെ തന്നെ.
3750 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്നത് ഒഴികെ, പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിൽ SOD പ്രവർത്തനത്തിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമൊന്നുമില്ല. 0, 750, 2250 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ/മീ2 കുമ്മായം ചേർക്കുമ്പോൾ, 0.2 mol/l സാന്ദ്രതയിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചു ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ SOD പ്രവർത്തനം ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിക്കാതെ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനേക്കാൾ ഗണ്യമായി കൂടുതലായിരുന്നു, ഇത് യഥാക്രമം 177.89%, 61.62%, 45.08% എന്നിങ്ങനെ വർദ്ധിച്ചു. കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കാത്തപ്പോഴും 0.2 mol/l സാന്ദ്രതയിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചു ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ വേരുകളിലെ SOD പ്രവർത്തനം (598.18 U g-1) ഏറ്റവും ഉയർന്നതായിരുന്നു. അതേ സാന്ദ്രതയിൽ അല്ലെങ്കിൽ 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചപ്പോൾ, കുമ്മായം ചേർക്കുന്നതിന്റെ അളവ് കൂടുന്നതിനനുസരിച്ച് SOD പ്രവർത്തനം വർദ്ധിച്ചു. 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചതിന് ശേഷം, SOD പ്രവർത്തനം ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു (ചിത്രം 2).
കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദത്തിൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരുകളിലെ സൂപ്പർഓക്സൈഡ് ഡിസ്മുട്ടേസ്, പെറോക്സിഡേസ്, കാറ്റലേസ് എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനത്തിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം.
വേരുകളിലെ SOD പ്രവർത്തനം പോലെ, കുമ്മായം ചേർക്കാതെ 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ച വേരുകളിലെ POD പ്രവർത്തനം ഏറ്റവും ഉയർന്നതായിരുന്നു (63.33 µmol g-1), ഇത് നിയന്ത്രണത്തേക്കാൾ 148.35% കൂടുതലാണ് (25.50 µmol g-1). ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുകയും 3750 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുകയും ചെയ്തതോടെ, POD പ്രവർത്തനം ആദ്യം വർദ്ധിക്കുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്തു. 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്കിടെ POD പ്രവർത്തനം 36.31% കുറഞ്ഞു (ചിത്രം 2).
0.2 mol/l ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുകയും 2250 kg/h/m2 അല്ലെങ്കിൽ 3750 kg/h/m2 കുമ്മായം ചേർക്കുകയും ചെയ്തതൊഴിച്ചാൽ, CAT പ്രവർത്തനം നിയന്ത്രണത്തേക്കാൾ വളരെ കൂടുതലായിരുന്നു. 0.1 mol/l ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുകയും 0.2250 kg/m2 അല്ലെങ്കിൽ 3750 kg/h/m2 കുമ്മായം ചേർക്കുകയും ചെയ്തപ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാത്ത ചികിത്സയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ CAT പ്രവർത്തനം യഥാക്രമം 276.08%, 276.69%, 33.05% എന്നിങ്ങനെ വർദ്ധിച്ചു. കുമ്മായം ചേർക്കാത്ത ചികിത്സയിലും 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ചികിത്സയിലും വേരുകളിലെ CAT പ്രവർത്തനം ഏറ്റവും ഉയർന്നതായിരുന്നു (803.52 μmol/g). 3750 kg/h/m കുമ്മായം, 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ CAT പ്രവർത്തനം ഏറ്റവും താഴ്ന്നതായിരുന്നു (172.88 μmol/g).
പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളുടെ CAT പ്രവർത്തനവും MDA പ്രവർത്തനവും തളിച്ച ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയോ കുമ്മായത്തിന്റെയോ അളവുമായും രണ്ട് ചികിത്സകളുമായും (പട്ടിക 3) ഗണ്യമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെന്ന് ദ്വിവാരിയേറ്റ് വിശകലനം കാണിച്ചു. വേരുകളിലെ SOD പ്രവർത്തനം കുമ്മായത്തിന്റെയും ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും ചികിത്സയുമായോ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ സാന്ദ്രതയുമായോ കാര്യമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. റൂട്ട് POD പ്രവർത്തനം പ്രയോഗിക്കുന്ന കുമ്മായത്തിന്റെ അളവിനെയോ കുമ്മായത്തിന്റെയും ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും ചികിത്സയെയോ ഗണ്യമായി ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു.
കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്നതിന്റെ അളവും ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേയുടെ സാന്ദ്രതയും വർദ്ധിച്ചതോടെ വേരുകളിൽ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ് കുറഞ്ഞു. കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കാതെയും 750 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ/മീറ്റർ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുമ്പോഴും പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിൽ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമൊന്നും ഉണ്ടായില്ല. 2250 കിലോഗ്രാം/മീറ്റർ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ, 0.2 മോൾ/ലിറ്റർ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ് ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെ ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ഉള്ളതിനേക്കാൾ ഗണ്യമായി കൂടുതലായിരുന്നു, ഇത് 22.81% വർദ്ധിച്ചു. 3750 കിലോഗ്രാം h/മീറ്റർ കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ, സ്പ്രേ ചെയ്ത ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിച്ചതിനാൽ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ് ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെ ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ഉള്ളതിനേക്കാൾ 0.2 മോൾ L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ് 38.77% കുറഞ്ഞു. കൂടാതെ, 0.2 mol·L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയിൽ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ് ഉണ്ടായിരുന്നു, അത് 205.80 mg·g-1 ആയിരുന്നു (ചിത്രം 3).
കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദത്തിൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ ലയിക്കുന്ന മൊത്തം പഞ്ചസാരയുടെയും ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീന്റെയും ഉള്ളടക്കത്തിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം.
കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്നതിന്റെയും ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയുടെയും അളവ് വർദ്ധിച്ചതോടെ വേരുകളിലെ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീന്റെ അളവ് കുറഞ്ഞു. കുമ്മായം ചേർക്കാതെ, 0.2 mol L-1 സാന്ദ്രതയിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീന്റെ അളവ് നിയന്ത്രണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ 16.20% ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു. 750 kg/h കുമ്മായം പ്രയോഗിച്ചപ്പോൾ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളുടെ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ ഉള്ളടക്കത്തിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. 2250 kg/h/m2 കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്ന സാഹചര്യങ്ങളിൽ, 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയുടെ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ ഉള്ളടക്കം നോൺ-ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയേക്കാൾ (35.11%) ഗണ്യമായി കൂടുതലായിരുന്നു. 3750 kg·h/m2 കുമ്മായം പ്രയോഗിച്ചപ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിച്ചതിനാൽ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ ഉള്ളടക്കം ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ 0.2 mol·L-1 ആയിരുന്നപ്പോൾ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ ഉള്ളടക്കം (269.84 μg·g-1). ചികിത്സ (ചിത്രം 3).
കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കാത്തതിനാൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരിൽ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ഉള്ളടക്കത്തിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുകയും 750 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ/മീ2 കുമ്മായം ചേർക്കുകയും ചെയ്തതോടെ, സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ഉള്ളടക്കം ആദ്യം കുറയുകയും പിന്നീട് വർദ്ധിക്കുകയും ചെയ്തു. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെയുള്ള ചികിത്സയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, 2250 കിലോഗ്രാം hm-2 കുമ്മായവും 0.2 mol l-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡും തളിക്കുമ്പോൾ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ഉള്ളടക്കം 33.58% ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുകയും 3750 കിലോഗ്രാം/മീ2 കുമ്മായം ചേർക്കുകയും ചെയ്തതോടെ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ഉള്ളടക്കം ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് അല്ലാത്ത സ്പ്രേ ചികിത്സയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയുടെ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡിന്റെ ഉള്ളടക്കം 49.76% കുറഞ്ഞു. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ഇല്ലാതെ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡിന്റെ അളവ് ഏറ്റവും ഉയർന്നതായിരുന്നു, 2.09 mg g-1 ആയിരുന്നു. 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയിൽ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ ഫ്രീ അമിനോ ആസിഡ് ഉള്ളടക്കം (1.05 mg/g) ഉണ്ടായിരുന്നു (ചിത്രം 4).
കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദ സാഹചര്യങ്ങളിൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരുകളിലെ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകളുടെയും പ്രോലൈനിന്റെയും ഉള്ളടക്കത്തിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം.
കുമ്മായത്തിന്റെ അളവിലും ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുന്നതിന്റെ അളവിലും വർദ്ധനവുണ്ടായതോടെ വേരുകളിലെ പ്രോലൈനിന്റെ അളവ് കുറഞ്ഞു. കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കാത്തപ്പോൾ പനാക്സ് ജിൻസെങ് വേരിന്റെ പ്രോലൈനിന്റെ അളവിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുകയും 750 അല്ലെങ്കിൽ 2250 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുകയും ചെയ്തപ്പോൾ, ആദ്യം പ്രോലൈനിന്റെ അളവ് കുറയുകയും പിന്നീട് വർദ്ധിക്കുകയും ചെയ്തു. 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയുടെ പ്രോലൈനിന്റെ അളവ് 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയേക്കാൾ ഗണ്യമായി കൂടുതലായിരുന്നു, ഇത് യഥാക്രമം 19.52% ഉം 44.33% ഉം വർദ്ധിച്ചു. 3750 kg/m2 കുമ്മായം ചേർത്തപ്പോൾ, സ്പ്രേ ചെയ്ത ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിച്ചതിനാൽ പ്രോലൈനിന്റെ അളവ് ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു. 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചെയ്തതിനുശേഷം, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെ ഉപയോഗിച്ചതിനേക്കാൾ പ്രോലൈനിന്റെ അളവ് 54.68% കുറഞ്ഞു. 0.2 mol/l ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ചപ്പോൾ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ പ്രോലൈൻ ഉള്ളടക്കം കണ്ടെത്തി, അത് 11.37 μg/g ആയിരുന്നു (ചിത്രം 4).
പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിലെ ആകെ സാപ്പോണിൻ ഉള്ളടക്കം Rg1>Rb1>R1 ആണ്. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേയുടെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിലും കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കാതെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിലും മൂന്ന് സാപ്പോണിനുകളുടെ ഉള്ളടക്കത്തിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല (പട്ടിക 4).
ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെയും 750 അല്ലെങ്കിൽ 3750 കിലോഗ്രാം/m2 എന്ന കുമ്മായ അളവ് പ്രയോഗിക്കാതെയും തളിച്ചതിന് ശേഷമുള്ള R1 അളവ് 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചതിന് ശേഷമുള്ള R1 അളവ് ഗണ്യമായി കുറവായിരുന്നു. 0 അല്ലെങ്കിൽ 0.1 mol/L എന്ന കുമ്മായ സാന്ദ്രതയിൽ, കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് വർദ്ധിച്ചുവരുമ്പോൾ R1 അളവിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമുണ്ടായില്ല. 0.2 mol/L ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുമ്പോൾ, 3750 കിലോഗ്രാം/h/m2 കുമ്മായത്തിൽ R1 അളവ് കുമ്മായവും ചേർക്കാതെ 43.84% എന്നതിനേക്കാൾ ഗണ്യമായി കുറവായിരുന്നു (പട്ടിക 4).
ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുകയും 750 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായം ചേർക്കുകയും ചെയ്തതോടെ, ആദ്യം Rg1 ഉള്ളടക്കം വർദ്ധിക്കുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്തു. 2250 ഉം 3750 കിലോഗ്രാം/h കുമ്മായം പ്രയോഗിക്കുന്ന നിരക്കിൽ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് Rg1 ഉള്ളടക്കം കുറഞ്ഞു. സ്പ്രേ ചെയ്ത ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ അതേ സാന്ദ്രതയിൽ, കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച്, Rg1 ഉള്ളടക്കം ആദ്യം വർദ്ധിക്കുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്യുന്നു. നിയന്ത്രണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും 750 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായം ചികിത്സയുടെയും മൂന്ന് സാന്ദ്രതകളിലെ Rg1 ഉള്ളടക്കം ഒഴികെ, മറ്റ് ചികിത്സകളിലെ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ Rg1 ഉള്ളടക്കം നിയന്ത്രണത്തേക്കാൾ കുറവായിരുന്നു. 750 കിലോഗ്രാം/h/m2 കുമ്മായം, 0.1 മോൾ/l ഓക്സാലിക് ആസിഡ് എന്നിവ തളിക്കുമ്പോഴാണ് Rg1 ന്റെ പരമാവധി ഉള്ളടക്കം, ഇത് നിയന്ത്രണത്തേക്കാൾ 11.54% കൂടുതലാണ് (പട്ടിക 4).
ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സ്പ്രേ സാന്ദ്രതയും പ്രയോഗിക്കുന്ന കുമ്മായത്തിന്റെ അളവും 2250 കിലോഗ്രാം/മണിക്കൂർ എന്ന ഫ്ലോ റേറ്റിൽ വർദ്ധിച്ചതോടെ, ആദ്യം Rb1 ഉള്ളടക്കം വർദ്ധിക്കുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്തു. 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിച്ചതിന് ശേഷം, Rb1 ഉള്ളടക്കം പരമാവധി മൂല്യമായ 3.46% ൽ എത്തി, ഇത് ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കാതെ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനേക്കാൾ 74.75% കൂടുതലാണ്. മറ്റ് കുമ്മായ ചികിത്സകൾക്ക്, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേയുടെ വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതകൾക്കിടയിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. 0.1 ഉം 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡും ഉപയോഗിച്ച് തളിച്ചതിന് ശേഷം, കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച്, ആദ്യം Rb1 ഉള്ളടക്കം കുറയുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്തു (പട്ടിക 4).
ഓക്സാലിക് ആസിഡിനൊപ്പം സ്പ്രേ ചെയ്യുന്ന അതേ സാന്ദ്രതയിൽ, കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച്, ഫ്ലേവനോയിഡുകളുടെ അളവ് ആദ്യം വർദ്ധിക്കുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്തു. കുമ്മായവും 3750 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായവും ഇല്ലാതെ വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതയിലുള്ള ഓക്സാലിക് ആസിഡും തളിക്കുമ്പോൾ ഫ്ലേവനോയിഡുകളുടെ അളവിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല. 750 ഉം 2250 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായവും ചേർക്കുമ്പോൾ, സ്പ്രേ ചെയ്യുന്ന ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച്, ഫ്ലേവനോയിഡുകളുടെ അളവ് ആദ്യം വർദ്ധിക്കുകയും പിന്നീട് കുറയുകയും ചെയ്തു. 750 കിലോഗ്രാം/m2 പ്രയോഗിക്കുകയും 0.1 മോൾ/l എന്ന സാന്ദ്രതയിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുകയും ചെയ്യുമ്പോൾ, ഫ്ലേവനോയിഡുകളുടെ അളവ് പരമാവധി ആയിരുന്നു - 4.38 മില്ലിഗ്രാം/ഗ്രാം, ഇത് അതേ അളവിൽ കുമ്മായം ചേർക്കുന്നതിനേക്കാൾ 18.38% കൂടുതലാണ്, കൂടാതെ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കേണ്ട ആവശ്യമില്ല. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് രഹിത ചികിത്സയും 2250 കിലോഗ്രാം/m2 എന്ന അളവിൽ കുമ്മായം ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയും താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ഫ്ലേവനോയ്ഡുകളുടെ അളവ് 21.74% വർദ്ധിച്ചു (ചിത്രം 5).
കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദത്തിൽ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരിലെ ഫ്ലേവനോയ്ഡുകളുടെ ഉള്ളടക്കത്തിൽ ഓക്സലേറ്റ് ഇലകളിൽ തളിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം.
പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ ലയിക്കുന്ന പഞ്ചസാരയുടെ അളവ്, തളിക്കുന്ന കുമ്മായത്തിന്റെ അളവിനെയും തളിക്കുന്ന ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രതയെയും ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നുവെന്ന് ബിവേരിയേറ്റ് വിശകലനം കാണിച്ചു. വേരുകളിലെ ലയിക്കുന്ന പ്രോട്ടീന്റെ അളവ് കുമ്മായത്തിന്റെയും ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും അളവുമായി ഗണ്യമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. വേരുകളിലെ സ്വതന്ത്ര അമിനോ ആസിഡുകളുടെയും പ്രോലൈനിന്റെയും ഉള്ളടക്കം പ്രയോഗിക്കുന്ന കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ്, ഓക്സാലിക് ആസിഡ്, നാരങ്ങ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് എന്നിവയുടെ സാന്ദ്രതയുമായി ഗണ്യമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (പട്ടിക 5).
പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ് വേരുകളിലെ R1 ഉള്ളടക്കം സ്പ്രേ ചെയ്ത ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ സാന്ദ്രത, പ്രയോഗിക്കുന്ന കുമ്മായം, കുമ്മായം, ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ അളവ് എന്നിവയെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു. ഫ്ലേവനോയിഡുകളുടെ ഉള്ളടക്കം ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേയുടെ സാന്ദ്രതയെയും ചേർക്കുന്ന കുമ്മായത്തിന്റെ അളവിനെയും ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു.
മണ്ണിൽ കാഡ്മിയത്തിന്റെ അളവ് കുറയ്ക്കുന്നതിന് കുമ്മായം, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് എന്നിവ പോലുള്ള നിരവധി ഭേദഗതികൾ ഉപയോഗിച്ചിട്ടുണ്ട്30. വിളകളിലെ കാഡ്മിയത്തിന്റെ അളവ് കുറയ്ക്കുന്നതിനുള്ള മണ്ണ് ഭേദഗതിയായി കുമ്മായം വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു31. കനത്ത ലോഹങ്ങളാൽ മലിനമായ മണ്ണിനെ പരിഹരിക്കുന്നതിനും ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിക്കാമെന്ന് ലിയാങ് തുടങ്ങിയവർ 32 റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. മലിനമായ മണ്ണിൽ വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതയിലുള്ള ഓക്സാലിക് ആസിഡുകൾ ചേർത്തതിനുശേഷം, മണ്ണിലെ ജൈവവസ്തുക്കളുടെ അളവ് വർദ്ധിച്ചു, കാറ്റേഷൻ എക്സ്ചേഞ്ച് ശേഷി കുറഞ്ഞു, pH വർദ്ധിച്ചു33. മണ്ണിലെ ലോഹ അയോണുകളുമായും ഓക്സാലിക് ആസിഡിന് പ്രതിപ്രവർത്തിക്കാൻ കഴിയും. സിഡി സമ്മർദ്ദ സാഹചര്യങ്ങളിൽ, നിയന്ത്രണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിലെ സിഡി ഉള്ളടക്കം ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു. എന്നിരുന്നാലും, കുമ്മായം ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ, അത് ഗണ്യമായി കുറയുന്നു. ഈ പഠനത്തിൽ 750 കിലോഗ്രാം/എച്ച്/എം കുമ്മായം പ്രയോഗിച്ചപ്പോൾ, വേരുകളുടെ സിഡി ഉള്ളടക്കം ദേശീയ നിലവാരത്തിലെത്തി (സിഡി പരിധി സിഡി≤0.5 മില്ലിഗ്രാം/കിലോ, AQSIQ, GB/T 19086-200834), ഫലം നല്ലതായിരുന്നു. . 2250 കിലോഗ്രാം/m2 കുമ്മായം ചേർക്കുന്നതിലൂടെയാണ് ഏറ്റവും മികച്ച ഫലം ലഭിക്കുന്നത്. കുമ്മായം ചേർക്കുന്നത് മണ്ണിൽ Ca2+, Cd2+ എന്നിവയ്ക്കായി ധാരാളം മത്സര സൈറ്റുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ചേർക്കുന്നത് പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരുകളിലെ Cd ഉള്ളടക്കം കുറയ്ക്കുന്നു. കുമ്മായവും ഓക്സാലിക് ആസിഡും കലർത്തിയ ശേഷം, പനാക്സ് ജിൻസെങ് വേരിന്റെ Cd ഉള്ളടക്കം ഗണ്യമായി കുറയുകയും ദേശീയ നിലവാരത്തിലെത്തുകയും ചെയ്യുന്നു. മണ്ണിലെ Ca2+ ഒരു മാസ് ഫ്ലോ പ്രക്രിയയിലൂടെ വേരിന്റെ ഉപരിതലത്തിലേക്ക് ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ കാൽസ്യം ചാനലുകൾ (Ca2+ ചാനലുകൾ), കാൽസ്യം പമ്പുകൾ (Ca2+-AT-Pase), Ca2+/H+ ആന്റിപോർട്ടറുകൾ എന്നിവയിലൂടെ വേരുകളുടെ കോശങ്ങളിലേക്ക് ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുകയും തുടർന്ന് തിരശ്ചീനമായി വേരുകളിലേക്ക് കൊണ്ടുപോകുകയും ചെയ്യാം. സൈലം23. വേരുകളിൽ Ca യും Cd ഉള്ളടക്കവും തമ്മിൽ ഒരു പ്രധാന നെഗറ്റീവ് പരസ്പരബന്ധം ഉണ്ടായിരുന്നു (P < 0.05). Ca യും Cd യും തമ്മിലുള്ള വൈരുദ്ധ്യം എന്ന ആശയവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന Ca യുടെ അളവ് വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് Cd ഉള്ളടക്കം കുറഞ്ഞു. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരിലെ Ca യുടെ ഉള്ളടക്കത്തിൽ കുമ്മായത്തിന്റെ അളവ് ഗണ്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നുവെന്ന് ANOVA കാണിച്ചു. കാൽസ്യം ഓക്സലേറ്റ് പരലുകളിൽ Cd ഓക്സലേറ്റുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും Ca യുമായി മത്സരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നുവെന്ന് പോങ്‌റാക്ക് തുടങ്ങിയവർ 35 റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. എന്നിരുന്നാലും, Ca യിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ നിയന്ത്രണ പ്രഭാവം നിസ്സാരമായിരുന്നു. ഓക്സാലിക് ആസിഡിൽ നിന്നും Ca2+ ൽ നിന്നും കാൽസ്യം ഓക്സലേറ്റിന്റെ അവശിഷ്ടം ലളിതമായ അവശിഷ്ടമല്ലെന്നും, കോപ്രെസിപിറ്റേഷൻ പ്രക്രിയ നിരവധി ഉപാപചയ പാതകളിലൂടെ നിയന്ത്രിക്കാമെന്നും ഇത് കാണിക്കുന്നു.
കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദത്തിൽ, സസ്യങ്ങളിൽ വലിയ അളവിൽ റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷീസുകൾ (ROS) രൂപം കൊള്ളുന്നു, ഇത് കോശ സ്തരങ്ങളുടെ ഘടനയെ നശിപ്പിക്കുന്നു36. ROS ന്റെ അളവും സസ്യങ്ങളുടെ പ്ലാസ്മ മെംബ്രണിനുണ്ടാകുന്ന നാശത്തിന്റെ അളവും വിലയിരുത്തുന്നതിന് ഒരു സൂചകമായി മാലോണ്ടിയാൾഡിഹൈഡ് (MDA) ഉള്ളടക്കം ഉപയോഗിക്കാം37. റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷീസുകളെ തോട്ടിപ്പണി ചെയ്യുന്നതിനുള്ള ഒരു പ്രധാന സംരക്ഷണ സംവിധാനമാണ് ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് സിസ്റ്റം38. ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് എൻസൈമുകളുടെ (POD, SOD, CAT എന്നിവയുൾപ്പെടെ) പ്രവർത്തനങ്ങൾ സാധാരണയായി കാഡ്മിയം സമ്മർദ്ദത്താൽ മാറ്റപ്പെടുന്നു. MDA ഉള്ളടക്കം Cd സാന്ദ്രതയുമായി പോസിറ്റീവ് ആയി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, ഇത് സസ്യ മെംബ്രണിലെ ലിപിഡ് പെറോക്‌സിഡേഷന്റെ വ്യാപ്തി വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന Cd സാന്ദ്രതയോടൊപ്പം ആഴത്തിലാകുന്നുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു37. ഇത് ഔയാങ് തുടങ്ങിയവരുടെ പഠന ഫലങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.39. MDA ഉള്ളടക്കത്തെ കുമ്മായം, ഓക്സാലിക് ആസിഡ്, നാരങ്ങ, ഓക്സാലിക് ആസിഡ് എന്നിവ ഗണ്യമായി സ്വാധീനിക്കുന്നുവെന്ന് ഈ പഠനം കാണിക്കുന്നു. 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ നെബുലൈസേഷനുശേഷം, പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ MDA ഉള്ളടക്കം കുറഞ്ഞു, ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ഓക്സാലിക് ആസിഡിന് പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിലെ സിഡി, ആർഒഎസ് അളവ് എന്നിവയുടെ ജൈവ ലഭ്യത കുറയ്ക്കാൻ കഴിയുമെന്നാണ്. സസ്യങ്ങളുടെ വിഷവിമുക്തമാക്കൽ പ്രവർത്തനം നടക്കുന്നത് ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് എൻസൈം സിസ്റ്റത്തിലാണ്. സസ്യകോശങ്ങളിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന O2-നെ SOD നീക്കം ചെയ്യുകയും വിഷരഹിതമായ O2, കുറഞ്ഞ വിഷാംശം ഉള്ള H2O2 എന്നിവ ഉത്പാദിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. POD, CAT എന്നിവ സസ്യകലകളിൽ നിന്ന് H2O2 നീക്കം ചെയ്യുകയും H2O2 നെ H2O ആയി വിഘടിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. iTRAQ പ്രോട്ടീം വിശകലനത്തിന്റെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ, Cd40 സമ്മർദ്ദത്തിൽ കുമ്മായം പ്രയോഗിച്ചതിന് ശേഷം SOD, PAL എന്നിവയുടെ പ്രോട്ടീൻ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ കുറയുകയും POD യുടെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ വർദ്ധിക്കുകയും ചെയ്തതായി കണ്ടെത്തി. പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ വേരിലെ CAT, SOD, POD എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനങ്ങളെ ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെയും കുമ്മായത്തിന്റെയും അളവ് ഗണ്യമായി ബാധിച്ചു. 0.1 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള സ്പ്രേ ചികിത്സ SOD, CAT എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനം ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിച്ചു, എന്നാൽ POD പ്രവർത്തനത്തിലുള്ള നിയന്ത്രണ പ്രഭാവം വ്യക്തമായിരുന്നില്ല. ഇത് കാണിക്കുന്നത് ഓക്സാലിക് ആസിഡ് Cd സമ്മർദ്ദത്തിൽ ROS ന്റെ വിഘടനം ത്വരിതപ്പെടുത്തുകയും CAT യുടെ പ്രവർത്തനം നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെ H2O2 നീക്കം ചെയ്യുന്നത് പ്രധാനമായും പൂർത്തിയാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു എന്നാണ്, ഇത് സ്യൂഡോസ്പെർമം സിബിറിക്കത്തിന്റെ ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് എൻസൈമുകളെക്കുറിച്ചുള്ള ഗുവോ തുടങ്ങിയവരുടെ ഗവേഷണ ഫലങ്ങൾക്ക് സമാനമാണ്. കോസ്. ). ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് സിസ്റ്റത്തിലെ എൻസൈമുകളുടെ പ്രവർത്തനത്തിലും മാലോണ്ടിയാൾഡിഹൈഡിന്റെ ഉള്ളടക്കത്തിലും 750 കിലോഗ്രാം/എച്ച്/എം2 കുമ്മായം ചേർക്കുന്നതിന്റെ ഫലം ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തളിക്കുന്നതിന്റെ ഫലത്തിന് സമാനമാണ്. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് സ്പ്രേ ചികിത്സയ്ക്ക് പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിൽ SOD, CAT എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ കൂടുതൽ ഫലപ്രദമായി വർദ്ധിപ്പിക്കാനും പനാക്സ് നോട്ടോജിൻസെങ്ങിന്റെ സമ്മർദ്ദ പ്രതിരോധം വർദ്ധിപ്പിക്കാനും കഴിയുമെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. 0.2 mol L-1 ഓക്സാലിക് ആസിഡും 3750 kg hm-2 കുമ്മായവും ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയിലൂടെ SOD, POD എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ കുറഞ്ഞു. ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിലുള്ള ഓക്സാലിക് ആസിഡും Ca2+ ഉം അമിതമായി തളിക്കുന്നത് സസ്യ സമ്മർദ്ദത്തിന് കാരണമാകുമെന്ന് ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ലുവോയുടെയും മറ്റും പഠനവുമായി ഇത് പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. വെയ്റ്റ് 42.